广西医学
廣西醫學
엄서의학
GUANGXI MEDICAL JOURNAL
2011年
5期
513-515
,共3页
肖飞%晁耐霞%曾庆堂%黄健%蒋日婷%罗国容
肖飛%晁耐霞%曾慶堂%黃健%蔣日婷%囉國容
초비%조내하%증경당%황건%장일정%라국용
GCF2%原核表达%pET-30a
GCF2%原覈錶達%pET-30a
GCF2%원핵표체%pET-30a
目的 构建肝癌相关抗原GCF2基因片断(323～1 234 bp)原核表达重组质粒.方法 提取人肝癌组织总RNA,通过反转录酶合成cDNA;根据GenBank公布的GCF2基因cDNA序列设计引物,利用RT-PCR法扩增出人GCF2基因片断(编号2-5a),将此片段连接在克隆载体pGEM-T上进行测序,通过酶切、连接将目的 片断重组到原核表达载体pET-30a上.结果 酶切电泳鉴定结果显示GCF2基因同源片段克隆入载体中,测序结果证实克隆的基因序列与GenBank中GCF2基因相应序列完全相符.结论 获得了含人GCF2基因同源片段重组原核表达质粒pET-30a/GCF2-5a,为进一步表达和纯化GCF2基因片段重组蛋白奠定了基础.
目的 構建肝癌相關抗原GCF2基因片斷(323～1 234 bp)原覈錶達重組質粒.方法 提取人肝癌組織總RNA,通過反轉錄酶閤成cDNA;根據GenBank公佈的GCF2基因cDNA序列設計引物,利用RT-PCR法擴增齣人GCF2基因片斷(編號2-5a),將此片段連接在剋隆載體pGEM-T上進行測序,通過酶切、連接將目的 片斷重組到原覈錶達載體pET-30a上.結果 酶切電泳鑒定結果顯示GCF2基因同源片段剋隆入載體中,測序結果證實剋隆的基因序列與GenBank中GCF2基因相應序列完全相符.結論 穫得瞭含人GCF2基因同源片段重組原覈錶達質粒pET-30a/GCF2-5a,為進一步錶達和純化GCF2基因片段重組蛋白奠定瞭基礎.
목적 구건간암상관항원GCF2기인편단(323～1 234 bp)원핵표체중조질립.방법 제취인간암조직총RNA,통과반전록매합성cDNA;근거GenBank공포적GCF2기인cDNA서렬설계인물,이용RT-PCR법확증출인GCF2기인편단(편호2-5a),장차편단련접재극륭재체pGEM-T상진행측서,통과매절、련접장목적 편단중조도원핵표체재체pET-30a상.결과 매절전영감정결과현시GCF2기인동원편단극륭입재체중,측서결과증실극륭적기인서렬여GenBank중GCF2기인상응서렬완전상부.결론 획득료함인GCF2기인동원편단중조원핵표체질립pET-30a/GCF2-5a,위진일보표체화순화GCF2기인편단중조단백전정료기출.
