重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2011年
5期
564-568
,共5页
谢靖芸%吕铁伟%朱静%陈国珍%孙慧超%刘振国%田杰
謝靖蕓%呂鐵偉%硃靜%陳國珍%孫慧超%劉振國%田傑
사정예%려철위%주정%진국진%손혜초%류진국%전걸
MAPCs%Oct-4%大鼠%5-aza%心肌细胞%细胞分化
MAPCs%Oct-4%大鼠%5-aza%心肌細胞%細胞分化
MAPCs%Oct-4%대서%5-aza%심기세포%세포분화
目的:明确骨髓多能成体祖细胞(Bonemarrowmultipotent adult progenitor cells,MAPCs)体外向心肌特异性分化及其与八聚体结合转录因子4(Octamer-bindingtranscriptionfactor-4,Oct-4)表达的相关性.方法:将大鼠骨髓中分离出的MAPCs,在无血清培养基中连续培养35 d,采用5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-aza,l μmol/L)诱导24 h促使其向心肌细胞分化.结果:MAPCs在5-aza诱导的24 h后早期心脏特异性基因NKx2.5与GATA-4的mRNA水平显著增加,Western blot和免疫荧光染色显示心肌特异性蛋白Connexin-43与肌钙蛋白I在5-aza诱导后的7 d开始表达,流式细胞分析表明在35 d后超过37%的细胞为肌钙蛋白I阳性;同时实时定量聚合酶链反应、Western blot、免疫荧光染色和流式细胞技术检测到未分化的MAPCs高表达特异性干细胞标志物Oct-4,但在心肌分化过程中其表达明显下降.结论:MAPCs在5-aza诱导后能够有效地分化为心肌样细胞,并与Oct-4的表达下调相关.
目的:明確骨髓多能成體祖細胞(Bonemarrowmultipotent adult progenitor cells,MAPCs)體外嚮心肌特異性分化及其與八聚體結閤轉錄因子4(Octamer-bindingtranscriptionfactor-4,Oct-4)錶達的相關性.方法:將大鼠骨髓中分離齣的MAPCs,在無血清培養基中連續培養35 d,採用5-氮雜胞苷(5-azacytidine,5-aza,l μmol/L)誘導24 h促使其嚮心肌細胞分化.結果:MAPCs在5-aza誘導的24 h後早期心髒特異性基因NKx2.5與GATA-4的mRNA水平顯著增加,Western blot和免疫熒光染色顯示心肌特異性蛋白Connexin-43與肌鈣蛋白I在5-aza誘導後的7 d開始錶達,流式細胞分析錶明在35 d後超過37%的細胞為肌鈣蛋白I暘性;同時實時定量聚閤酶鏈反應、Western blot、免疫熒光染色和流式細胞技術檢測到未分化的MAPCs高錶達特異性榦細胞標誌物Oct-4,但在心肌分化過程中其錶達明顯下降.結論:MAPCs在5-aza誘導後能夠有效地分化為心肌樣細胞,併與Oct-4的錶達下調相關.
목적:명학골수다능성체조세포(Bonemarrowmultipotent adult progenitor cells,MAPCs)체외향심기특이성분화급기여팔취체결합전록인자4(Octamer-bindingtranscriptionfactor-4,Oct-4)표체적상관성.방법:장대서골수중분리출적MAPCs,재무혈청배양기중련속배양35 d,채용5-담잡포감(5-azacytidine,5-aza,l μmol/L)유도24 h촉사기향심기세포분화.결과:MAPCs재5-aza유도적24 h후조기심장특이성기인NKx2.5여GATA-4적mRNA수평현저증가,Western blot화면역형광염색현시심기특이성단백Connexin-43여기개단백I재5-aza유도후적7 d개시표체,류식세포분석표명재35 d후초과37%적세포위기개단백I양성;동시실시정량취합매련반응、Western blot、면역형광염색화류식세포기술검측도미분화적MAPCs고표체특이성간세포표지물Oct-4,단재심기분화과정중기표체명현하강.결론:MAPCs재5-aza유도후능구유효지분화위심기양세포,병여Oct-4적표체하조상관.
