组织工程与重建外科杂志
組織工程與重建外科雜誌
조직공정여중건외과잡지
JOURNAL OF TISSUE ENGINEERING AND RECONSTRUCTIVE SURGERY
2012年
3期
140-145
,共6页
杨娴娴%Jodie T Hatfield%Susan J Hinze%穆雄铮%Peter J Anderson%Barry C Powell
楊嫻嫻%Jodie T Hatfield%Susan J Hinze%穆雄錚%Peter J Anderson%Barry C Powell
양한한%Jodie T Hatfield%Susan J Hinze%목웅쟁%Peter J Anderson%Barry C Powell
颅缝早闭症%荧光定量聚合酶链反应%geNorm分析
顱縫早閉癥%熒光定量聚閤酶鏈反應%geNorm分析
로봉조폐증%형광정량취합매련반응%geNorm분석
目的 探讨用于颅缝早闭症相关实验的荧光定量PCR的最佳内参基因.方法 应用与颅骨成骨、颅缝闭合相关的3组实验标本,分别为:Fgfr2cC342y/+Crouzon综合征小鼠颅缝组织、颅缝早闭患者体外培养颅缝原代细胞和体外培养的小鼠Kusa 4b 10成骨细胞株.以常用的候选管家基因作为研究对象,利用 geNorm软件对RT -qPCR结果进行比较分析,以筛选出在不同组织细胞中表达最为稳定的管家基因作为内参.结果 Fgfr2C342Y/+c小鼠颅缝组织,Cyc1-Gapdh- Canx为最佳组合;颅缝早闭症患者体外培养颅缝原代细胞,18S rRNA和ATP5B为最佳组合;体外培养的小鼠Kusa 4b10成骨细胞株,18S rRNA和Canx为最佳组合.选择不同内参基因对目的基因RT-qPCR的结果影响显著.结论 在设计RT-qPCR实验之前,应针对所选择的标本类型与种类进行管家基因稳定性分析,以增加结果的可信度.
目的 探討用于顱縫早閉癥相關實驗的熒光定量PCR的最佳內參基因.方法 應用與顱骨成骨、顱縫閉閤相關的3組實驗標本,分彆為:Fgfr2cC342y/+Crouzon綜閤徵小鼠顱縫組織、顱縫早閉患者體外培養顱縫原代細胞和體外培養的小鼠Kusa 4b 10成骨細胞株.以常用的候選管傢基因作為研究對象,利用 geNorm軟件對RT -qPCR結果進行比較分析,以篩選齣在不同組織細胞中錶達最為穩定的管傢基因作為內參.結果 Fgfr2C342Y/+c小鼠顱縫組織,Cyc1-Gapdh- Canx為最佳組閤;顱縫早閉癥患者體外培養顱縫原代細胞,18S rRNA和ATP5B為最佳組閤;體外培養的小鼠Kusa 4b10成骨細胞株,18S rRNA和Canx為最佳組閤.選擇不同內參基因對目的基因RT-qPCR的結果影響顯著.結論 在設計RT-qPCR實驗之前,應針對所選擇的標本類型與種類進行管傢基因穩定性分析,以增加結果的可信度.
목적 탐토용우로봉조폐증상관실험적형광정량PCR적최가내삼기인.방법 응용여로골성골、로봉폐합상관적3조실험표본,분별위:Fgfr2cC342y/+Crouzon종합정소서로봉조직、로봉조폐환자체외배양로봉원대세포화체외배양적소서Kusa 4b 10성골세포주.이상용적후선관가기인작위연구대상,이용 geNorm연건대RT -qPCR결과진행비교분석,이사선출재불동조직세포중표체최위은정적관가기인작위내삼.결과 Fgfr2C342Y/+c소서로봉조직,Cyc1-Gapdh- Canx위최가조합;로봉조폐증환자체외배양로봉원대세포,18S rRNA화ATP5B위최가조합;체외배양적소서Kusa 4b10성골세포주,18S rRNA화Canx위최가조합.선택불동내삼기인대목적기인RT-qPCR적결과영향현저.결론 재설계RT-qPCR실험지전,응침대소선택적표본류형여충류진행관가기인은정성분석,이증가결과적가신도.
