哈尔滨医科大学学报
哈爾濱醫科大學學報
합이빈의과대학학보
JOURNAL OF HARBIN MEDICAL UNIVERSITY
2005年
2期
107-110
,共4页
阴离子交换蛋白1%磷酸钙转染%蛋白表达%6-甲氧基-N-(3-磺丙基)喹啉铵
陰離子交換蛋白1%燐痠鈣轉染%蛋白錶達%6-甲氧基-N-(3-磺丙基)喹啉銨
음리자교환단백1%린산개전염%단백표체%6-갑양기-N-(3-광병기)규람안
目的在人胚肾HEK293t(293t)细胞高效表达具有阴离子转运活性的阴离子交换蛋白1(AE1).方法用传统磷酸钙转染法将质粒pRBG4-AE1转入293t细胞,免疫荧光及Western blotting验证蛋白表达及正常的细胞膜定位后,应用6-甲氧基-N-(3-磺丙基)喹啉铵(SPQ)观察表达的AE1是否具有阴离子转运活性.结果在293t细胞中,显示AE1高效表达.转染pRBG4-AE1后293t细胞相对于正常以及转染空载体对照组的阴离子交换功能明显增强.结论利用传统磷酸钙转染法,在293t可高效表达具有正常跨膜拓扑结构及阴离子转运活性的AE1,为进一步研究其相关功能奠定了基础.
目的在人胚腎HEK293t(293t)細胞高效錶達具有陰離子轉運活性的陰離子交換蛋白1(AE1).方法用傳統燐痠鈣轉染法將質粒pRBG4-AE1轉入293t細胞,免疫熒光及Western blotting驗證蛋白錶達及正常的細胞膜定位後,應用6-甲氧基-N-(3-磺丙基)喹啉銨(SPQ)觀察錶達的AE1是否具有陰離子轉運活性.結果在293t細胞中,顯示AE1高效錶達.轉染pRBG4-AE1後293t細胞相對于正常以及轉染空載體對照組的陰離子交換功能明顯增彊.結論利用傳統燐痠鈣轉染法,在293t可高效錶達具有正常跨膜拓撲結構及陰離子轉運活性的AE1,為進一步研究其相關功能奠定瞭基礎.
목적재인배신HEK293t(293t)세포고효표체구유음리자전운활성적음리자교환단백1(AE1).방법용전통린산개전염법장질립pRBG4-AE1전입293t세포,면역형광급Western blotting험증단백표체급정상적세포막정위후,응용6-갑양기-N-(3-광병기)규람안(SPQ)관찰표체적AE1시부구유음리자전운활성.결과재293t세포중,현시AE1고효표체.전염pRBG4-AE1후293t세포상대우정상이급전염공재체대조조적음리자교환공능명현증강.결론이용전통린산개전염법,재293t가고효표체구유정상과막탁복결구급음리자전운활성적AE1,위진일보연구기상관공능전정료기출.
