农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2007年
2期
263-267
,共5页
蓝猪耳%衔接头 PCR%磷脂酶 C%启动子
藍豬耳%銜接頭 PCR%燐脂酶 C%啟動子
람저이%함접두 PCR%린지매 C%계동자
应用衔接头PCR技术,以蓝猪耳(Torenia fournieri)全基因组DNA分别经Dra Ⅰ、EcoR Ⅴ、Pvu Ⅱ和Sma Ⅰ消化后与衔接头连接产物为模板,用衔接头引物和TfPLC1基因的特异引物经过多轮的巢式PCR,先后克隆到2个798和813 bp的TfPLC1基因上游序列;经测序、blast比较分析和拼接得到一个蓝猪耳TfPLC1基因的启动子序列,共1 432 bp.序列分析表明它含有类似于TATAbox和CAATbox的元件,在其远端上游区域还有多个AT富含区,而且还含有多个胚乳特异表达启动子的元件.将该启动子全序列和5'端缺失的700 bp序列与PBI121分别构建了植物表达载体PPP1326和PPP700,用于转化蓝猪耳,以验证该启动子的功能.
應用銜接頭PCR技術,以藍豬耳(Torenia fournieri)全基因組DNA分彆經Dra Ⅰ、EcoR Ⅴ、Pvu Ⅱ和Sma Ⅰ消化後與銜接頭連接產物為模闆,用銜接頭引物和TfPLC1基因的特異引物經過多輪的巢式PCR,先後剋隆到2箇798和813 bp的TfPLC1基因上遊序列;經測序、blast比較分析和拼接得到一箇藍豬耳TfPLC1基因的啟動子序列,共1 432 bp.序列分析錶明它含有類似于TATAbox和CAATbox的元件,在其遠耑上遊區域還有多箇AT富含區,而且還含有多箇胚乳特異錶達啟動子的元件.將該啟動子全序列和5'耑缺失的700 bp序列與PBI121分彆構建瞭植物錶達載體PPP1326和PPP700,用于轉化藍豬耳,以驗證該啟動子的功能.
응용함접두PCR기술,이람저이(Torenia fournieri)전기인조DNA분별경Dra Ⅰ、EcoR Ⅴ、Pvu Ⅱ화Sma Ⅰ소화후여함접두련접산물위모판,용함접두인물화TfPLC1기인적특이인물경과다륜적소식PCR,선후극륭도2개798화813 bp적TfPLC1기인상유서렬;경측서、blast비교분석화병접득도일개람저이TfPLC1기인적계동자서렬,공1 432 bp.서렬분석표명타함유유사우TATAbox화CAATbox적원건,재기원단상유구역환유다개AT부함구,이차환함유다개배유특이표체계동자적원건.장해계동자전서렬화5'단결실적700 bp서렬여PBI121분별구건료식물표체재체PPP1326화PPP700,용우전화람저이,이험증해계동자적공능.
