CAJ | 학술논문

按照GenBank上公布的兔出血症病毒(RHDV)基因序列设计1对引物,以RHDV发病兔的新鲜肝为材料,提取总RNA,进行cDNA的合成和PCR扩增,结果能扩增出与预期的269 bp大小一致的片段,该产物序列与公布的RHDV基因序列同源性95.8%～98.5%.该方法可特异性地检测出RHDV,其最小检出RHDV的RNA浓度为1.66 ng/μL,敏感性为血凝试验(HA)的4×104倍,表明已成功地建立了RHDV RT-PCR检测方法.用该方法和HA对兔出血症发病兔各组织脏器进行检测,结果表明,在检测发病死亡兔各脏器中,HA检测阳性的病料为肝脏、肾脏、脾脏、血液和肺,而RT-PCR检测除粪便外,其它均为阳性;该方法还能够检测出-20℃保存12个月的阳性病料.表明RT-PCR方法检测RHDV特异性强、敏感度高、重复性好,不仅可用于RHD临床诊断和流行病学调查,而且在兔肉等兔类产品的检疫方面具有很好的应用前景.
안조GenBank상공포적토출혈증병독(RHDV)기인서렬설계1대인물,이RHDV발병토적신선간위재료,제취총RNA,진행cDNA적합성화PCR확증,결과능확증출여예기적269 bp대소일치적편단,해산물서렬여공포적RHDV기인서렬동원성95.8%～98.5%.해방법가특이성지검측출RHDV,기최소검출RHDV적RNA농도위1.66 ng/μL,민감성위혈응시험(HA)적4×104배,표명이성공지건립료RHDV RT-PCR검측방법.용해방법화HA대토출혈증발병토각조직장기진행검측,결과표명,재검측발병사망토각장기중,HA검측양성적병료위간장、신장、비장、혈액화폐,이RT-PCR검측제분편외,기타균위양성;해방법환능구검측출-20℃보존12개월적양성병료.표명RT-PCR방법검측RHDV특이성강、민감도고、중복성호,불부가용우RHD림상진단화류행병학조사,이차재토육등토류산품적검역방면구유흔호적응용전경.