中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2008年
6期
1119-1123
,共5页
RNA干扰%短发夹RNA%Survivin%Daudi细胞%阿霉素
RNA榦擾%短髮夾RNA%Survivin%Daudi細胞%阿黴素
RNA간우%단발협RNA%Survivin%Daudi세포%아매소
目的:探讨RNA干扰下调Burkitt淋巴瘤Daudi细胞系凋亡抑制基因survivin的表达对阿霉素敏感性的影响.方法:构建survivin发夹RNA(shRNA)真核表达载体,脂质体介导转染Daudi细胞.多重RT-PCR检测survivin mRNA表达;Western blotting检测Survivin蛋白表达;流式细胞仪(FCM)检测干扰前后细胞凋亡率;MTT法检测干扰前后细胞对化疗药物阿霉素(adriamycin, ADR)敏感性变化.结果:与无功能control-shRNA处理组和PBS处理组比较,转染survivin-shRNA细胞的survivin mRNA和蛋白表达率显著降低,抑制率分别为62.32%和61.88%(P<0.05);FCM结果示转染组细胞凋亡指数(apoptosis index, AI)显著高于两对照组(P<0.05);MTY结果显示,转染组细胞的阿霉素半数抑制浓度(IC50)为(0.25±0.43)μmol/L,显著低于无功能control-shRNA处理组(0.87±0.21)μmol/L和PBS处理组(0.91±0.36)μmol/L,P<0.05;相同剂量ADR对转染细胞的生长抑制率明显高于PBS组和control组.结论:发夹RNA干扰survivin基因可显著提高Daudi细胞凋亡率和对化疗药物阿霉素的敏感性.
目的:探討RNA榦擾下調Burkitt淋巴瘤Daudi細胞繫凋亡抑製基因survivin的錶達對阿黴素敏感性的影響.方法:構建survivin髮夾RNA(shRNA)真覈錶達載體,脂質體介導轉染Daudi細胞.多重RT-PCR檢測survivin mRNA錶達;Western blotting檢測Survivin蛋白錶達;流式細胞儀(FCM)檢測榦擾前後細胞凋亡率;MTT法檢測榦擾前後細胞對化療藥物阿黴素(adriamycin, ADR)敏感性變化.結果:與無功能control-shRNA處理組和PBS處理組比較,轉染survivin-shRNA細胞的survivin mRNA和蛋白錶達率顯著降低,抑製率分彆為62.32%和61.88%(P<0.05);FCM結果示轉染組細胞凋亡指數(apoptosis index, AI)顯著高于兩對照組(P<0.05);MTY結果顯示,轉染組細胞的阿黴素半數抑製濃度(IC50)為(0.25±0.43)μmol/L,顯著低于無功能control-shRNA處理組(0.87±0.21)μmol/L和PBS處理組(0.91±0.36)μmol/L,P<0.05;相同劑量ADR對轉染細胞的生長抑製率明顯高于PBS組和control組.結論:髮夾RNA榦擾survivin基因可顯著提高Daudi細胞凋亡率和對化療藥物阿黴素的敏感性.
목적:탐토RNA간우하조Burkitt림파류Daudi세포계조망억제기인survivin적표체대아매소민감성적영향.방법:구건survivin발협RNA(shRNA)진핵표체재체,지질체개도전염Daudi세포.다중RT-PCR검측survivin mRNA표체;Western blotting검측Survivin단백표체;류식세포의(FCM)검측간우전후세포조망솔;MTT법검측간우전후세포대화료약물아매소(adriamycin, ADR)민감성변화.결과:여무공능control-shRNA처리조화PBS처리조비교,전염survivin-shRNA세포적survivin mRNA화단백표체솔현저강저,억제솔분별위62.32%화61.88%(P<0.05);FCM결과시전염조세포조망지수(apoptosis index, AI)현저고우량대조조(P<0.05);MTY결과현시,전염조세포적아매소반수억제농도(IC50)위(0.25±0.43)μmol/L,현저저우무공능control-shRNA처리조(0.87±0.21)μmol/L화PBS처리조(0.91±0.36)μmol/L,P<0.05;상동제량ADR대전염세포적생장억제솔명현고우PBS조화control조.결론:발협RNA간우survivin기인가현저제고Daudi세포조망솔화대화료약물아매소적민감성.
