安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2008年
21期
8946-8948,8972
,共4页
ETR1%RNA干扰%短发夹环RNA%重组体
ETR1%RNA榦擾%短髮夾環RNA%重組體
ETR1%RNA간우%단발협배RNA%중조체
[目的]构建拟南芥乙烯受体(ETR1)特异性短发夹环RNA(shRNA)真核表达栽体.[方法]从ETR1基因cDNA序列上选取目标序列,设计2对引物,经PCR扩增得到正反向2个DNA片段(S51和AI),构建含有该正反向互补重复序列DNA片段的中间栽体,测序分析正确后再克隆到植物表达载体pCAMBIA1301中的Gus位置并经双酶切证实.[结果]ETR1基因S51和AI片段被成功克隆进质粒pCAMBIA1301中,酶切鉴定及测序分析显示,重组质粒shRNA编码序列与设计片段的序列完全一致.[结论]ETR1靶向RNA干扰重组体的成功构建,为进一步获得拟南芥乙烯受体基因的功能缺失突变体奠定良好基础.
[目的]構建擬南芥乙烯受體(ETR1)特異性短髮夾環RNA(shRNA)真覈錶達栽體.[方法]從ETR1基因cDNA序列上選取目標序列,設計2對引物,經PCR擴增得到正反嚮2箇DNA片段(S51和AI),構建含有該正反嚮互補重複序列DNA片段的中間栽體,測序分析正確後再剋隆到植物錶達載體pCAMBIA1301中的Gus位置併經雙酶切證實.[結果]ETR1基因S51和AI片段被成功剋隆進質粒pCAMBIA1301中,酶切鑒定及測序分析顯示,重組質粒shRNA編碼序列與設計片段的序列完全一緻.[結論]ETR1靶嚮RNA榦擾重組體的成功構建,為進一步穫得擬南芥乙烯受體基因的功能缺失突變體奠定良好基礎.
[목적]구건의남개을희수체(ETR1)특이성단발협배RNA(shRNA)진핵표체재체.[방법]종ETR1기인cDNA서렬상선취목표서렬,설계2대인물,경PCR확증득도정반향2개DNA편단(S51화AI),구건함유해정반향호보중복서렬DNA편단적중간재체,측서분석정학후재극륭도식물표체재체pCAMBIA1301중적Gus위치병경쌍매절증실.[결과]ETR1기인S51화AI편단피성공극륭진질립pCAMBIA1301중,매절감정급측서분석현시,중조질립shRNA편마서렬여설계편단적서렬완전일치.[결론]ETR1파향RNA간우중조체적성공구건,위진일보획득의남개을희수체기인적공능결실돌변체전정량호기출.
