食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2009年
13期
227-231
,共5页
王弘%刘细霞%潘科%雷红涛%沈玉栋%孙远明
王弘%劉細霞%潘科%雷紅濤%瀋玉棟%孫遠明
왕홍%류세하%반과%뢰홍도%침옥동%손원명
克伦特罗%单链抗体%结构预测
剋倫特囉%單鏈抗體%結構預測
극륜특라%단련항체%결구예측
目的:构建抗克伦特罗单链抗体(scFv)基因cbl,进行蛋白质结构模拟并对其理化特性进行分析.方法:采用重叠延伸PCR方法,以能特异性分泌抗克伦特罗mAb的杂交瘤细胞株5D1为原料,构建抗克伦特罗scFv基因cbl,进行测序,采用生物信息软件对氨基酸序列推导并进行结构预测,同时对理化性质进行分析.结果:抗克伦特罗scFv基因cbl全长720bp,对应225个氨基酸,单链抗体分子量约为25826.6,等电点预测值8.78,为碱性蛋白质;二级结构显示抗克伦特罗单链抗体含α螺旋20处,β折叠99处,β转角28处,随机卷曲93处.cbl三级结构建模显示重链(VH)和轻链(VL)形成一个疏水的"口袋",Linker游离于此结构之外,符合scFv的结构特点,明显具有抗原结合位点的空间构象,理论上应该具有良好的抗原结合活性.结论:构建一个抗克伦特罗scFv基因cbl,应用信息学技术所获得的预测和分析结果为抗克伦特罗单链抗体的进一步表达、纯化和活性研究提供信息.
目的:構建抗剋倫特囉單鏈抗體(scFv)基因cbl,進行蛋白質結構模擬併對其理化特性進行分析.方法:採用重疊延伸PCR方法,以能特異性分泌抗剋倫特囉mAb的雜交瘤細胞株5D1為原料,構建抗剋倫特囉scFv基因cbl,進行測序,採用生物信息軟件對氨基痠序列推導併進行結構預測,同時對理化性質進行分析.結果:抗剋倫特囉scFv基因cbl全長720bp,對應225箇氨基痠,單鏈抗體分子量約為25826.6,等電點預測值8.78,為堿性蛋白質;二級結構顯示抗剋倫特囉單鏈抗體含α螺鏇20處,β摺疊99處,β轉角28處,隨機捲麯93處.cbl三級結構建模顯示重鏈(VH)和輕鏈(VL)形成一箇疏水的"口袋",Linker遊離于此結構之外,符閤scFv的結構特點,明顯具有抗原結閤位點的空間構象,理論上應該具有良好的抗原結閤活性.結論:構建一箇抗剋倫特囉scFv基因cbl,應用信息學技術所穫得的預測和分析結果為抗剋倫特囉單鏈抗體的進一步錶達、純化和活性研究提供信息.
목적:구건항극륜특라단련항체(scFv)기인cbl,진행단백질결구모의병대기이화특성진행분석.방법:채용중첩연신PCR방법,이능특이성분비항극륜특라mAb적잡교류세포주5D1위원료,구건항극륜특라scFv기인cbl,진행측서,채용생물신식연건대안기산서렬추도병진행결구예측,동시대이화성질진행분석.결과:항극륜특라scFv기인cbl전장720bp,대응225개안기산,단련항체분자량약위25826.6,등전점예측치8.78,위감성단백질;이급결구현시항극륜특라단련항체함α라선20처,β절첩99처,β전각28처,수궤권곡93처.cbl삼급결구건모현시중련(VH)화경련(VL)형성일개소수적"구대",Linker유리우차결구지외,부합scFv적결구특점,명현구유항원결합위점적공간구상,이론상응해구유량호적항원결합활성.결론:구건일개항극륜특라scFv기인cbl,응용신식학기술소획득적예측화분석결과위항극륜특라단련항체적진일보표체、순화화활성연구제공신식.
