中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2010年
46期
8551-8554
,共4页
关节软骨细胞%Ⅱ型胶原酶%胰蛋白酶%联合消化%甲苯胺蓝%苏木精-伊红染色
關節軟骨細胞%Ⅱ型膠原酶%胰蛋白酶%聯閤消化%甲苯胺藍%囌木精-伊紅染色
관절연골세포%Ⅱ형효원매%이단백매%연합소화%갑분알람%소목정-이홍염색
背景:近年来,众多研究欲采用体外分离培养的关节软骨细胞作为修复缺损的关节软骨的种子细胞,然而,获得纯化的具有生物活性的关节软骨细胞较为困难.目的:拟运用胰蛋白酶与Ⅱ型胶原酶联合消化获取关节软骨细胞.方法:从SD大鼠的正常股骨及胫骨关节表面获取关节软骨,先后运用0.25%的胰蛋白酶和0.2%Ⅱ型胶原酶消化,显微镜下见大量细胞游离后,弃去大块的未消化的关节软骨碎片,离心,去上清,PBS洗涤2次后,加入软骨细胞原代培养液进行培养、增殖.应用甲苯胺蓝及苏木精-伊红染色方法检验所得细胞是否为关节软骨细胞.结果与结论:在严格掌握酶的浓度及消化时间的前提下,通过0.25%胰蛋白酶和0.2%Ⅱ型胶原酶联合酶解关节软骨的方法,成功从大鼠股骨及胫骨关节软骨内分离培养出细胞,并经过甲苯胺蓝染色及苏木精-伊红染色证实,所得的细胞为具有生物活性的关节软骨细胞.
揹景:近年來,衆多研究欲採用體外分離培養的關節軟骨細胞作為脩複缺損的關節軟骨的種子細胞,然而,穫得純化的具有生物活性的關節軟骨細胞較為睏難.目的:擬運用胰蛋白酶與Ⅱ型膠原酶聯閤消化穫取關節軟骨細胞.方法:從SD大鼠的正常股骨及脛骨關節錶麵穫取關節軟骨,先後運用0.25%的胰蛋白酶和0.2%Ⅱ型膠原酶消化,顯微鏡下見大量細胞遊離後,棄去大塊的未消化的關節軟骨碎片,離心,去上清,PBS洗滌2次後,加入軟骨細胞原代培養液進行培養、增殖.應用甲苯胺藍及囌木精-伊紅染色方法檢驗所得細胞是否為關節軟骨細胞.結果與結論:在嚴格掌握酶的濃度及消化時間的前提下,通過0.25%胰蛋白酶和0.2%Ⅱ型膠原酶聯閤酶解關節軟骨的方法,成功從大鼠股骨及脛骨關節軟骨內分離培養齣細胞,併經過甲苯胺藍染色及囌木精-伊紅染色證實,所得的細胞為具有生物活性的關節軟骨細胞.
배경:근년래,음다연구욕채용체외분리배양적관절연골세포작위수복결손적관절연골적충자세포,연이,획득순화적구유생물활성적관절연골세포교위곤난.목적:의운용이단백매여Ⅱ형효원매연합소화획취관절연골세포.방법:종SD대서적정상고골급경골관절표면획취관절연골,선후운용0.25%적이단백매화0.2%Ⅱ형효원매소화,현미경하견대량세포유리후,기거대괴적미소화적관절연골쇄편,리심,거상청,PBS세조2차후,가입연골세포원대배양액진행배양、증식.응용갑분알람급소목정-이홍염색방법검험소득세포시부위관절연골세포.결과여결론:재엄격장악매적농도급소화시간적전제하,통과0.25%이단백매화0.2%Ⅱ형효원매연합매해관절연골적방법,성공종대서고골급경골관절연골내분리배양출세포,병경과갑분알람염색급소목정-이홍염색증실,소득적세포위구유생물활성적관절연골세포.
