人骨肉瘤耐药细胞系MG-63/PTX的建立及多药耐药机制研究
인골육류내약세포계MG-63/PTX적건립급다약내약궤제연구
A study of establishment of multidrug resistant cell line MG-63/PTX in human osteosarcoma and the mechanism of multidrug resistance
  • 万方数据
    中国骨肿瘤骨病 중국골종류골병
    CHINESE JOURNAL OF BONE TUMOR AND BONE DISEASE
    2011年 3期 270-276 ,共7页

    纪振钢%李钊%韩忠孝%裘秀春%胡运生%陈翔%马保安%周勇%马琼%赵艳立%范清宇

    기진강%리쇠%한충효%구수춘%호운생%진상%마보안%주용%마경%조염립%범청우

    骨肉瘤%耐药细胞系%多药耐药 骨肉瘤%耐藥細胞繫%多藥耐藥
    골육류%내약세포계%다약내약
    目的 建立人骨肉瘤细胞多药耐药亚系,探讨骨肉瘤细胞多药耐药的发生机制.方法 采用紫杉醇大剂量间断冲击培养法,诱导建立紫杉醇耐药骨肉瘤细胞系(MG-63/PTX),并运用MTT法检测6种药物敏感性变化及细胞生长规律变化,流式细胞仪分析亲本细胞系和耐药细胞系的细胞膜表面P-gp蛋白表达率、罗丹明123排出情况,RT-PCR检测细胞内耐药基因的变化,免疫细胞化学法检测细胞内P-gp蛋白的表达,Westernblotting法检测细胞内P-gp蛋白的表达.结果 历时12个月建成人骨肉瘤耐药细胞系MG-63/PTX,能在含PTX1μg/mL的培养基中稳定生长并传代,其对PTX的耐药指数为69.8,并与卡铂、顺铂、表柔比星、甲氨蝶呤、阿霉素等多种化疗药物存在不同程度的交叉耐药性;罗丹明123排出实验显示MG-63/PTX内罗丹明含量明显低于亲本细胞;RT-PCR结果显示在MG-63/PTX细胞系中存在MDR1、MRP1、LRP、ABCG2基因的表达,而在MG-63细胞系中无MDR1基因的表达.免疫细胞化学、流式细胞仪及Western blotting实验均显示在MG-63/PTX中存在P-gp的表达.结论 MDR1/ P-gp在多药耐药的特性上起着至关重要的作用,而且骨肉瘤多药耐药细胞亚系为进一步研究骨肉瘤耐药特征及逆转方法打下基础.
    목적 건립인골육류세포다약내약아계,탐토골육류세포다약내약적발생궤제.방법 채용자삼순대제량간단충격배양법,유도건립자삼순내약골육류세포계(MG-63/PTX),병운용MTT법검측6충약물민감성변화급세포생장규률변화,류식세포의분석친본세포계화내약세포계적세포막표면P-gp단백표체솔、라단명123배출정황,RT-PCR검측세포내내약기인적변화,면역세포화학법검측세포내P-gp단백적표체,Westernblotting법검측세포내P-gp단백적표체.결과 력시12개월건성인골육류내약세포계MG-63/PTX,능재함PTX1μg/mL적배양기중은정생장병전대,기대PTX적내약지수위69.8,병여잡박、순박、표유비성、갑안접령、아매소등다충화료약물존재불동정도적교차내약성;라단명123배출실험현시MG-63/PTX내라단명함량명현저우친본세포;RT-PCR결과현시재MG-63/PTX세포계중존재MDR1、MRP1、LRP、ABCG2기인적표체,이재MG-63세포계중무MDR1기인적표체.면역세포화학、류식세포의급Western blotting실험균현시재MG-63/PTX중존재P-gp적표체.결론 MDR1/ P-gp재다약내약적특성상기착지관중요적작용,이차골육류다약내약세포아계위진일보연구골육류내약특정급역전방법타하기출.
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