中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2000年
2期
206-209
,共4页
蒋太交%吉鑫松%章如安%袁中一
蔣太交%吉鑫鬆%章如安%袁中一
장태교%길흠송%장여안%원중일
辣根过氧化物酶%毕赤酵母%基因表达
辣根過氧化物酶%畢赤酵母%基因錶達
랄근과양화물매%필적효모%기인표체
为了开辟在甲醇酵母Pichia pastoris 中表达HRP的新途径，将编码成熟HRP同功酶C基因克隆到表达裁体pPIK3.5K中.pPIK3.5KHRP转化GS115后，用PCR筛选阳性P.pastoris重组株，并用甲醇进行诱导.Western印迹杂交分析表明目标蛋白(约为38 kD)能被天然HRP的多克隆抗体所识别，因此活性辣根过氧化物酶已在P.pastoris胞内表达.筛选菌株中显示了明显的过氧化物酶活性，同时诱导过程中血红素和CaCl2的加入对过氧化物酶的活力影响不大.
為瞭開闢在甲醇酵母Pichia pastoris 中錶達HRP的新途徑，將編碼成熟HRP同功酶C基因剋隆到錶達裁體pPIK3.5K中.pPIK3.5KHRP轉化GS115後，用PCR篩選暘性P.pastoris重組株，併用甲醇進行誘導.Western印跡雜交分析錶明目標蛋白(約為38 kD)能被天然HRP的多剋隆抗體所識彆，因此活性辣根過氧化物酶已在P.pastoris胞內錶達.篩選菌株中顯示瞭明顯的過氧化物酶活性，同時誘導過程中血紅素和CaCl2的加入對過氧化物酶的活力影響不大.
위료개벽재갑순효모Pichia pastoris 중표체HRP적신도경，장편마성숙HRP동공매C기인극륭도표체재체pPIK3.5K중.pPIK3.5KHRP전화GS115후，용PCR사선양성P.pastoris중조주，병용갑순진행유도.Western인적잡교분석표명목표단백(약위38 kD)능피천연HRP적다극륭항체소식별，인차활성랄근과양화물매이재P.pastoris포내표체.사선균주중현시료명현적과양화물매활성，동시유도과정중혈홍소화CaCl2적가입대과양화물매적활력영향불대.
