辽宁师范大学学报（自然科学版）
遼寧師範大學學報（自然科學版）
료녕사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF LIAONING NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2006年
3期
340-343
,共4页
潘凌子%方宏筠%李大力%王关林
潘凌子%方宏筠%李大力%王關林
반릉자%방굉균%리대력%왕관림
蜂毒肽%修饰%融合表达
蜂毒肽%脩飾%融閤錶達
봉독태%수식%융합표체
通过定点诱变的方法,对小分子蜂毒肽(melittin)基因进行修饰,引入了羟胺裂解位点,使蜂毒肽与其前体蛋白得以在体外融合表达.将融合的蜂毒肽前体蛋白(premelittin)经双酶切后克隆到原核表达载体PET-42a(+)中,PCR鉴定后转化至宿主菌BL21(DE3)中,在异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导下,在大肠杆菌中实现融合表达.为利用基因工程的方法表达毒性小分子多肽、实现该类药物的产业化打下基础.
通過定點誘變的方法,對小分子蜂毒肽(melittin)基因進行脩飾,引入瞭羥胺裂解位點,使蜂毒肽與其前體蛋白得以在體外融閤錶達.將融閤的蜂毒肽前體蛋白(premelittin)經雙酶切後剋隆到原覈錶達載體PET-42a(+)中,PCR鑒定後轉化至宿主菌BL21(DE3)中,在異丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)誘導下,在大腸桿菌中實現融閤錶達.為利用基因工程的方法錶達毒性小分子多肽、實現該類藥物的產業化打下基礎.
통과정점유변적방법,대소분자봉독태(melittin)기인진행수식,인입료간알렬해위점,사봉독태여기전체단백득이재체외융합표체.장융합적봉독태전체단백(premelittin)경쌍매절후극륭도원핵표체재체PET-42a(+)중,PCR감정후전화지숙주균BL21(DE3)중,재이병기류대-β-D-반유당감(IPTG)유도하,재대장간균중실현융합표체.위이용기인공정적방법표체독성소분자다태、실현해류약물적산업화타하기출.
