中国修复重建外科杂志
中國脩複重建外科雜誌
중국수복중건외과잡지
CHINESE JOURNAL OF REPARATIVE AND RECONSTRUCTIVE SURGERY
2006年
7期
754-757
,共4页
杨斌%洪清琦%徐令%丘日升%张琳%董月桐
楊斌%洪清琦%徐令%丘日升%張琳%董月桐
양빈%홍청기%서령%구일승%장림%동월동
组织工程%皮肤%表皮干细胞%快速分离
組織工程%皮膚%錶皮榦細胞%快速分離
조직공정%피부%표피간세포%쾌속분리
目的寻找一种快速可行的同期分离组织工程皮肤种子细胞--表皮细胞及成纤维细胞的方法. 方法取手术切除包皮,利用Ⅰ型胶原酶结合胰蛋白酶消化法,同期分离表皮细胞及成纤维细胞,观察细胞形态.对表皮细胞及表皮干细胞行PAN-FITC、K19-FITC荧光免疫染色及K19流式细胞仪鉴定;对成纤维细胞行波形蛋白FITC免疫荧光鉴定.并分别对两种细胞培养7 d,观察其生长情况. 结果应用Ⅰ型胶原酶结合胰蛋白酶,在3 h内快速分离得到表皮细胞及成纤维细胞,免疫荧光染色表皮细胞PAN-FITC染色均为阳性、K19-FITC染色部分阳性,流式细胞仪鉴定其K19阳性表达的细胞接近17%.表皮细胞培养48 h开始呈克隆样增长,至7 d生长停滞,向终末的角细胞分化.成纤维细胞体外培养7 d可扩增100倍,波形蛋白FITC免疫荧光染色呈阳性. 结论利用胶原酶结合胰蛋白酶消化法可在3 h内同期分离到用于构建复合型组织工程皮肤的种子细胞,为复合组织工程皮肤的快速构建提供了可能.
目的尋找一種快速可行的同期分離組織工程皮膚種子細胞--錶皮細胞及成纖維細胞的方法. 方法取手術切除包皮,利用Ⅰ型膠原酶結閤胰蛋白酶消化法,同期分離錶皮細胞及成纖維細胞,觀察細胞形態.對錶皮細胞及錶皮榦細胞行PAN-FITC、K19-FITC熒光免疫染色及K19流式細胞儀鑒定;對成纖維細胞行波形蛋白FITC免疫熒光鑒定.併分彆對兩種細胞培養7 d,觀察其生長情況. 結果應用Ⅰ型膠原酶結閤胰蛋白酶,在3 h內快速分離得到錶皮細胞及成纖維細胞,免疫熒光染色錶皮細胞PAN-FITC染色均為暘性、K19-FITC染色部分暘性,流式細胞儀鑒定其K19暘性錶達的細胞接近17%.錶皮細胞培養48 h開始呈剋隆樣增長,至7 d生長停滯,嚮終末的角細胞分化.成纖維細胞體外培養7 d可擴增100倍,波形蛋白FITC免疫熒光染色呈暘性. 結論利用膠原酶結閤胰蛋白酶消化法可在3 h內同期分離到用于構建複閤型組織工程皮膚的種子細胞,為複閤組織工程皮膚的快速構建提供瞭可能.
목적심조일충쾌속가행적동기분리조직공정피부충자세포--표피세포급성섬유세포적방법. 방법취수술절제포피,이용Ⅰ형효원매결합이단백매소화법,동기분리표피세포급성섬유세포,관찰세포형태.대표피세포급표피간세포행PAN-FITC、K19-FITC형광면역염색급K19류식세포의감정;대성섬유세포행파형단백FITC면역형광감정.병분별대량충세포배양7 d,관찰기생장정황. 결과응용Ⅰ형효원매결합이단백매,재3 h내쾌속분리득도표피세포급성섬유세포,면역형광염색표피세포PAN-FITC염색균위양성、K19-FITC염색부분양성,류식세포의감정기K19양성표체적세포접근17%.표피세포배양48 h개시정극륭양증장,지7 d생장정체,향종말적각세포분화.성섬유세포체외배양7 d가확증100배,파형단백FITC면역형광염색정양성. 결론이용효원매결합이단백매소화법가재3 h내동기분리도용우구건복합형조직공정피부적충자세포,위복합조직공정피부적쾌속구건제공료가능.
