汕头大学医学院学报
汕頭大學醫學院學報
산두대학의학원학보
JOURNAL OF SHANTOU UNIVERSITY MEDICAL COLLEGE
2007年
1期
5-9
,共5页
史咏梅%傅玉才%许铭炎%许锦阶%徐晓园%刘居理
史詠梅%傅玉纔%許銘炎%許錦階%徐曉園%劉居理
사영매%부옥재%허명염%허금계%서효완%류거리
阴道毛滴虫%β-半乳糖苷酶%cDNA克隆
陰道毛滴蟲%β-半乳糖苷酶%cDNA剋隆
음도모적충%β-반유당감매%cDNA극륭
目的:克隆并分析阴道毛滴虫(Trichomonas vaginalis, Tv)衰老生物学标志分子β-半乳糖苷酶(β-gal)同源基因,表达β-GAL重组蛋白.方法:从Tv cDNA表达文库中分离获得Tv β-gal同源基因的cDNA克隆,测序和序列分析.将cDNA部分片段亚克隆到原核表达载体(pQE-80L),转化宿主菌E.coli SG13009,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析鉴定.结果:在Tv cDNA文库中获得1株2 445 bp的cDNA克隆.序列分析表明,该序列开放读码框有2 415 bp,推测肽链具有804个氨基酸,等电点为5.4;该肽链与多种来源的β-GAL同源蛋白均具有较高同源性.用PCR扩增了该cDNA序列中的2 277 bp片段,构建了pQE-80L/Tv β-gal,所表达重组蛋白产物的相对分子质量为82 ku.结论:推测该克隆是Tv β-gal的同源基因,Tv β-gal基因可以在E.coli中得到表达,为进一步研究其细胞内定位和蛋白功能奠定了基础.
目的:剋隆併分析陰道毛滴蟲(Trichomonas vaginalis, Tv)衰老生物學標誌分子β-半乳糖苷酶(β-gal)同源基因,錶達β-GAL重組蛋白.方法:從Tv cDNA錶達文庫中分離穫得Tv β-gal同源基因的cDNA剋隆,測序和序列分析.將cDNA部分片段亞剋隆到原覈錶達載體(pQE-80L),轉化宿主菌E.coli SG13009,異丙基-β-D-硫代半乳糖苷誘導錶達,聚丙烯酰胺凝膠電泳分析鑒定.結果:在Tv cDNA文庫中穫得1株2 445 bp的cDNA剋隆.序列分析錶明,該序列開放讀碼框有2 415 bp,推測肽鏈具有804箇氨基痠,等電點為5.4;該肽鏈與多種來源的β-GAL同源蛋白均具有較高同源性.用PCR擴增瞭該cDNA序列中的2 277 bp片段,構建瞭pQE-80L/Tv β-gal,所錶達重組蛋白產物的相對分子質量為82 ku.結論:推測該剋隆是Tv β-gal的同源基因,Tv β-gal基因可以在E.coli中得到錶達,為進一步研究其細胞內定位和蛋白功能奠定瞭基礎.
목적:극륭병분석음도모적충(Trichomonas vaginalis, Tv)쇠로생물학표지분자β-반유당감매(β-gal)동원기인,표체β-GAL중조단백.방법:종Tv cDNA표체문고중분리획득Tv β-gal동원기인적cDNA극륭,측서화서렬분석.장cDNA부분편단아극륭도원핵표체재체(pQE-80L),전화숙주균E.coli SG13009,이병기-β-D-류대반유당감유도표체,취병희선알응효전영분석감정.결과:재Tv cDNA문고중획득1주2 445 bp적cDNA극륭.서렬분석표명,해서렬개방독마광유2 415 bp,추측태련구유804개안기산,등전점위5.4;해태련여다충래원적β-GAL동원단백균구유교고동원성.용PCR확증료해cDNA서렬중적2 277 bp편단,구건료pQE-80L/Tv β-gal,소표체중조단백산물적상대분자질량위82 ku.결론:추측해극륭시Tv β-gal적동원기인,Tv β-gal기인가이재E.coli중득도표체,위진일보연구기세포내정위화단백공능전정료기출.
