进化免疫球蛋白结合分子LD5的原核表达、纯化及结合活性
진화면역구단백결합분자LD5적원핵표체、순화급결합활성
Prokaryotic Expression,Purification and Binding Activity of Evolved Ig-binding Molecule LD5
  • 万方数据
    中国生物制品学杂志 중국생물제품학잡지
    CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
    2007年 5期 322-326 ,共5页

    蒋少华%徐容%何俊%陈璐%卢海妹%贾建安%陈秋莉%潘卫

    장소화%서용%하준%진로%로해매%가건안%진추리%반위

    进化免疫球蛋白结合分子%原核表达%结合活性 進化免疫毬蛋白結閤分子%原覈錶達%結閤活性
    진화면역구단백결합분자%원핵표체%결합활성
    目的 对新型进化免疫球蛋白(Ig)结合分子LD5进行原核表达和纯化,并鉴定其结合活性.方法 将LD5基因片段克隆入原核表达载体pET32a(+),转化大肠杆菌后,IPTG诱导表达.以8 mol/L尿素裂解菌体后,上清经Ni2+-NTA柱纯化,并对纯化蛋白进行SDS-PAGE及Western blot分析.以ELISA和Dot blot对LD5蛋白结合IgG、IgM活性进行鉴定.结果 LD5分子在大肠杆菌中获得成功表达,表达的融合蛋白相对分子质量为59 000.Western blot表明纯化的LD5蛋白能特异结合IgG.ELISA结果显示,LD5在结合IgM上较SpA具有明显的优势.结论 LD5分子在大肠杆菌中已成功表达,纯化的LD5蛋白保留了天然Ig结合分子的结合活性.
    목적 대신형진화면역구단백(Ig)결합분자LD5진행원핵표체화순화,병감정기결합활성.방법 장LD5기인편단극륭입원핵표체재체pET32a(+),전화대장간균후,IPTG유도표체.이8 mol/L뇨소렬해균체후,상청경Ni2+-NTA주순화,병대순화단백진행SDS-PAGE급Western blot분석.이ELISA화Dot blot대LD5단백결합IgG、IgM활성진행감정.결과 LD5분자재대장간균중획득성공표체,표체적융합단백상대분자질량위59 000.Western blot표명순화적LD5단백능특이결합IgG.ELISA결과현시,LD5재결합IgM상교SpA구유명현적우세.결론 LD5분자재대장간균중이성공표체,순화적LD5단백보류료천연Ig결합분자적결합활성.
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