微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2007年
4期
616-621
,共6页
应娇妍%杨苏声%刘双江%姜成英
應嬌妍%楊囌聲%劉雙江%薑成英
응교연%양소성%류쌍강%강성영
丛毛单胞菌(Comamonas)%聚羟基烷酸(PHA)%生物塑料%高分子聚酯
叢毛單胞菌(Comamonas)%聚羥基烷痠(PHA)%生物塑料%高分子聚酯
총모단포균(Comamonas)%취간기완산(PHA)%생물소료%고분자취지
分析了丛毛单胞菌(Comamonas sp.)CNB-1菌株在不同条件下合成聚羟基烷酸(polyhydroxyalkanoic acids,PHAs)的组分和含量,同时克隆了与PHA合成相关的基因.结果表明,该菌可以多种短链有机酸及醇类为碳源合成PHA多聚物或共聚物,以戊酸和1,4-丁二醇为底物时,可达菌体干重的57%;同时发现小分子醇类的存在能显著促进PHA的合成,推测与醇类氧化过程中提供了更多的还原力有关.为了克隆相关基因,利用已知phaC的保守区简并引物筛选基因组文库,将得到的阳性克隆质粒测序,发现phaC、phaA、phaB组成一个基因簇phaC-A-B.将phaC、phaA、phaB连接到pET载体在E.coli中共表达,重组E.coli菌株能合成PHA;将这3个基因单独连接到pET载体,在E.coli中表达后检测到相应酶活,分别约为原始菌株的4.1、71和2882倍.
分析瞭叢毛單胞菌(Comamonas sp.)CNB-1菌株在不同條件下閤成聚羥基烷痠(polyhydroxyalkanoic acids,PHAs)的組分和含量,同時剋隆瞭與PHA閤成相關的基因.結果錶明,該菌可以多種短鏈有機痠及醇類為碳源閤成PHA多聚物或共聚物,以戊痠和1,4-丁二醇為底物時,可達菌體榦重的57%;同時髮現小分子醇類的存在能顯著促進PHA的閤成,推測與醇類氧化過程中提供瞭更多的還原力有關.為瞭剋隆相關基因,利用已知phaC的保守區簡併引物篩選基因組文庫,將得到的暘性剋隆質粒測序,髮現phaC、phaA、phaB組成一箇基因簇phaC-A-B.將phaC、phaA、phaB連接到pET載體在E.coli中共錶達,重組E.coli菌株能閤成PHA;將這3箇基因單獨連接到pET載體,在E.coli中錶達後檢測到相應酶活,分彆約為原始菌株的4.1、71和2882倍.
분석료총모단포균(Comamonas sp.)CNB-1균주재불동조건하합성취간기완산(polyhydroxyalkanoic acids,PHAs)적조분화함량,동시극륭료여PHA합성상관적기인.결과표명,해균가이다충단련유궤산급순류위탄원합성PHA다취물혹공취물,이무산화1,4-정이순위저물시,가체균체간중적57%;동시발현소분자순류적존재능현저촉진PHA적합성,추측여순류양화과정중제공료경다적환원력유관.위료극륭상관기인,이용이지phaC적보수구간병인물사선기인조문고,장득도적양성극륭질립측서,발현phaC、phaA、phaB조성일개기인족phaC-A-B.장phaC、phaA、phaB련접도pET재체재E.coli중공표체,중조E.coli균주능합성PHA;장저3개기인단독련접도pET재체,재E.coli중표체후검측도상응매활,분별약위원시균주적4.1、71화2882배.
