CAJ | 학술논문

目的:探讨S-腺苷同型半胱氨酸(S-adenosylhomocysteine,SAH)升高对血管内皮细胞的损伤效应与整体基因组甲基化的关系.方法:以永生化的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)为研究对象,用不同浓度的S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(S-adenosylhomocysteine hydrolase,SAHH)抑制剂3-deazaadenosine(DZA)处理24、48、72h,使用光学显微镜观察细胞形态学变化,电子显微镜观察细胞器超微结构变化,反相高效液相色谱法(reversed phase high-performance liquid chromatography,RP-HPLC)测定胞内SAH浓度,荧光偏振免疫分析法(fluorescence polarization immunoassay,FPIA)测定Hcy的浓度,MTT法检测细胞生长增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,胞嘧啶延伸法检测整体基因组DNA甲基化水平.结果:HUVEC经DZA处理后,形态学上出现凋亡或坏死特征,培养基中同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)浓度下降,胞内SAH含量升高,细胞的生长增殖能力降低并出现凋亡现象,整体基因组的甲基化水平降低.结论:SAH升高能导致血管内皮细胞的损伤,且这种作用与整体基因组甲基化水平有关,SAH可能是动脉粥样硬化形成过程中的潜在生物标志分子.
목적:탐토S-선감동형반광안산(S-adenosylhomocysteine,SAH)승고대혈관내피세포적손상효응여정체기인조갑기화적관계.방법:이영생화적인제정맥내피세포(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)위연구대상,용불동농도적S-선감동형반광안산수해매(S-adenosylhomocysteine hydrolase,SAHH)억제제3-deazaadenosine(DZA)처리24、48、72h,사용광학현미경관찰세포형태학변화,전자현미경관찰세포기초미결구변화,반상고효액상색보법(reversed phase high-performance liquid chromatography,RP-HPLC)측정포내SAH농도,형광편진면역분석법(fluorescence polarization immunoassay,FPIA)측정Hcy적농도,MTT법검측세포생장증식능력,류식세포의검측세포조망솔,포밀정연신법검측정체기인조DNA갑기화수평.결과:HUVEC경DZA처리후,형태학상출현조망혹배사특정,배양기중동형반광안산(homocysteine,Hcy)농도하강,포내SAH함량승고,세포적생장증식능력강저병출현조망현상,정체기인조적갑기화수평강저.결론:SAH승고능도치혈관내피세포적손상,차저충작용여정체기인조갑기화수평유관,SAH가능시동맥죽양경화형성과정중적잠재생물표지분자.