安徽医科大学学报
安徽醫科大學學報
안휘의과대학학보
ACTA UNIVERSITY MEDICINALIS ANHUI
2008年
6期
612-615
,共4页
朱恒锐%汪云飞%张庆慧%武标%邢昕%刘晓颖%范礼斌
硃恆銳%汪雲飛%張慶慧%武標%邢昕%劉曉穎%範禮斌
주항예%왕운비%장경혜%무표%형흔%류효영%범례빈
基因表达%转染%蛋白质类%细胞株
基因錶達%轉染%蛋白質類%細胞株
기인표체%전염%단백질류%세포주
目的 建立稳定表达Sedlin蛋白的细胞株,研究Sed-lin蛋白在细胞内的分布.方法 扩增SEDL基因全长编码序列,经双酶切后克隆至真核表达载体pCDGFP中,将重组表达质粒转染至HEK 293细胞,用G418筛选阳性克隆,荧光显微镜和Western blot检测Sedlin蛋白的表达,并观察Sedlin蛋白在HEK 293细胞中的分布.结果 经测序鉴定,成功构建了SEDL基因的真核表达载体,转染HEK 293细胞后,Western blot检测,证明SEDL基因能够稳定有效的表达,荧光观察显示,Sedlin蛋白在细胞核和细胞质中都有表达.结论 成功建立了稳定表达Sedlin蛋白的细胞株,Sedlin蛋白广泛分布于整个细胞中.
目的 建立穩定錶達Sedlin蛋白的細胞株,研究Sed-lin蛋白在細胞內的分佈.方法 擴增SEDL基因全長編碼序列,經雙酶切後剋隆至真覈錶達載體pCDGFP中,將重組錶達質粒轉染至HEK 293細胞,用G418篩選暘性剋隆,熒光顯微鏡和Western blot檢測Sedlin蛋白的錶達,併觀察Sedlin蛋白在HEK 293細胞中的分佈.結果 經測序鑒定,成功構建瞭SEDL基因的真覈錶達載體,轉染HEK 293細胞後,Western blot檢測,證明SEDL基因能夠穩定有效的錶達,熒光觀察顯示,Sedlin蛋白在細胞覈和細胞質中都有錶達.結論 成功建立瞭穩定錶達Sedlin蛋白的細胞株,Sedlin蛋白廣汎分佈于整箇細胞中.
목적 건립은정표체Sedlin단백적세포주,연구Sed-lin단백재세포내적분포.방법 확증SEDL기인전장편마서렬,경쌍매절후극륭지진핵표체재체pCDGFP중,장중조표체질립전염지HEK 293세포,용G418사선양성극륭,형광현미경화Western blot검측Sedlin단백적표체,병관찰Sedlin단백재HEK 293세포중적분포.결과 경측서감정,성공구건료SEDL기인적진핵표체재체,전염HEK 293세포후,Western blot검측,증명SEDL기인능구은정유효적표체,형광관찰현시,Sedlin단백재세포핵화세포질중도유표체.결론 성공건립료은정표체Sedlin단백적세포주,Sedlin단백엄범분포우정개세포중.
