东北农业大学学报
東北農業大學學報
동북농업대학학보
JOURNAL OF NORTHEAST AGRICULTURAL UNIVERSITY
2009年
2期
88-91
,共4页
姜毓君%李一松%相丽%毕宇涵%赵凤
薑毓君%李一鬆%相麗%畢宇涵%趙鳳
강육군%리일송%상려%필우함%조봉
金黄色葡萄球菌%seα基因%RT-PCR
金黃色葡萄毬菌%seα基因%RT-PCR
금황색포도구균%seα기인%RT-PCR
金黄色葡萄球菌是引起细菌性食物中毒的重要病源菌之一,尤其是肠毒素.国内外由金黄色葡萄球菌肠毒素引发的食物中毒屡屡发生.目前,国内检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素仍采用传统的方法,其操作繁琐、检测时间较长,通常需要3～5 d才能完成,且灵敏度较低.本研究缩短食品中金黄色葡萄球菌肠毒素的检测时间,针对PCR检测的灵敏性、特异性,建立了检测金黄色葡萄球菌肠毒素的方法,为检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素提供了技术支持.分别采用TRIZol法和热酚法提取金黄色葡萄球菌总RNA并进行比较研究,在此基础上反转录获得cDNA,用特异引物对seα基因进行扩增,并优化PCR反应条件,获得理想的seα基因阳性扩增条带.结果表明,热酚法在总RNA提取方面优于TRIZol法,改进PER反应时间和循环次数,最终初步建立RT-PCR检测金黄色葡萄球菌A基因的方法.
金黃色葡萄毬菌是引起細菌性食物中毒的重要病源菌之一,尤其是腸毒素.國內外由金黃色葡萄毬菌腸毒素引髮的食物中毒屢屢髮生.目前,國內檢測食品中金黃色葡萄毬菌腸毒素仍採用傳統的方法,其操作繁瑣、檢測時間較長,通常需要3～5 d纔能完成,且靈敏度較低.本研究縮短食品中金黃色葡萄毬菌腸毒素的檢測時間,針對PCR檢測的靈敏性、特異性,建立瞭檢測金黃色葡萄毬菌腸毒素的方法,為檢測食品中金黃色葡萄毬菌腸毒素提供瞭技術支持.分彆採用TRIZol法和熱酚法提取金黃色葡萄毬菌總RNA併進行比較研究,在此基礎上反轉錄穫得cDNA,用特異引物對seα基因進行擴增,併優化PCR反應條件,穫得理想的seα基因暘性擴增條帶.結果錶明,熱酚法在總RNA提取方麵優于TRIZol法,改進PER反應時間和循環次數,最終初步建立RT-PCR檢測金黃色葡萄毬菌A基因的方法.
금황색포도구균시인기세균성식물중독적중요병원균지일,우기시장독소.국내외유금황색포도구균장독소인발적식물중독루루발생.목전,국내검측식품중금황색포도구균장독소잉채용전통적방법,기조작번쇄、검측시간교장,통상수요3～5 d재능완성,차령민도교저.본연구축단식품중금황색포도구균장독소적검측시간,침대PCR검측적령민성、특이성,건립료검측금황색포도구균장독소적방법,위검측식품중금황색포도구균장독소제공료기술지지.분별채용TRIZol법화열분법제취금황색포도구균총RNA병진행비교연구,재차기출상반전록획득cDNA,용특이인물대seα기인진행확증,병우화PCR반응조건,획득이상적seα기인양성확증조대.결과표명,열분법재총RNA제취방면우우TRIZol법,개진PER반응시간화순배차수,최종초보건립RT-PCR검측금황색포도구균A기인적방법.
