中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2011年
18期
3357-3360
,共4页
晏春根%黄丹文%任光圆%朱冬芳
晏春根%黃丹文%任光圓%硃鼕芳
안춘근%황단문%임광원%주동방
热休克蛋白72%基因表达%COS7细胞%转录%鉴定
熱休剋蛋白72%基因錶達%COS7細胞%轉錄%鑒定
열휴극단백72%기인표체%COS7세포%전록%감정
背景:体外克隆、表达热休克蛋白,尤其正常时少量或不表达,而应激时大量表达的热休克蛋白72对研究其缺血再灌注损伤中的作用尤为重要.目的:构建热休克蛋白72基因真核表达载体并于COS7细胞内表达,为HSP72蛋白免疫调节功能的研究奠定基础.方法:采用RT-PCR技术从BABL/C大鼠肝细胞中扩增出热休克蛋白72 cDNA,经限制性核酸内切酶消化后,插入真核表达载体pcDNA3.1(+)的相应酶切位点,并将重组质粒转染COS7细胞,进行基因表达鉴定.结果与结论:重组质粒插入基因序列检测证实为热休克蛋白72 cDNA,并能在COS7细胞稳定表达.成功构建热休克蛋白72真核表达载体,并于COS7细胞中成功转录与表达.
揹景:體外剋隆、錶達熱休剋蛋白,尤其正常時少量或不錶達,而應激時大量錶達的熱休剋蛋白72對研究其缺血再灌註損傷中的作用尤為重要.目的:構建熱休剋蛋白72基因真覈錶達載體併于COS7細胞內錶達,為HSP72蛋白免疫調節功能的研究奠定基礎.方法:採用RT-PCR技術從BABL/C大鼠肝細胞中擴增齣熱休剋蛋白72 cDNA,經限製性覈痠內切酶消化後,插入真覈錶達載體pcDNA3.1(+)的相應酶切位點,併將重組質粒轉染COS7細胞,進行基因錶達鑒定.結果與結論:重組質粒插入基因序列檢測證實為熱休剋蛋白72 cDNA,併能在COS7細胞穩定錶達.成功構建熱休剋蛋白72真覈錶達載體,併于COS7細胞中成功轉錄與錶達.
배경:체외극륭、표체열휴극단백,우기정상시소량혹불표체,이응격시대량표체적열휴극단백72대연구기결혈재관주손상중적작용우위중요.목적:구건열휴극단백72기인진핵표체재체병우COS7세포내표체,위HSP72단백면역조절공능적연구전정기출.방법:채용RT-PCR기술종BABL/C대서간세포중확증출열휴극단백72 cDNA,경한제성핵산내절매소화후,삽입진핵표체재체pcDNA3.1(+)적상응매절위점,병장중조질립전염COS7세포,진행기인표체감정.결과여결론:중조질립삽입기인서렬검측증실위열휴극단백72 cDNA,병능재COS7세포은정표체.성공구건열휴극단백72진핵표체재체,병우COS7세포중성공전록여표체.
