中国水稻科学
中國水稻科學
중국수도과학
CHINESE JOURNAL OF RICE SCIENCE
2008年
2期
111-117
,共7页
齐耀程%王宁%程彦伟%徐朗莱%张炜
齊耀程%王寧%程彥偉%徐朗萊%張煒
제요정%왕저%정언위%서랑래%장위
水稻%质膜%蛋白质组学%等电聚焦/十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶双向电泳%基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱%纳升电喷雾串联质谱
水稻%質膜%蛋白質組學%等電聚焦/十二烷基磺痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠雙嚮電泳%基質輔助激光解吸電離串聯飛行時間質譜%納升電噴霧串聯質譜
수도%질막%단백질조학%등전취초/십이완기광산납-취병희선알응효쌍향전영%기질보조격광해흡전리천련비행시간질보%납승전분무천련질보
以徐稻3号水稻苗期幼嫩根尖为材料,利用葡聚糖/聚乙二醇两相分配法纯化得到纯度达 90% 的质膜组分,使用优化的双向电泳水化液溶解质膜蛋白,通过等电聚焦/十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶双向电泳 (IEF/SDS-PAGE)分离和基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF)分析,鉴定了31个水稻质膜相关蛋白.结果表明IEF/SDS-PAGE 双向电泳适合分离亲水性相对较高的膜附着蛋白.进一步利用高盐和温和去污剂对纯化的质膜进行洗涤,以降低质膜组分的复杂程度,通过 SDS-PAGE 单向电泳分离和液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)分析,鉴定了 8个质膜蛋白.经洗涤后的质膜组分复杂度显著降低,SDS-PAGE 中的蛋白条带只包含1～2 种蛋白,且主要为疏水性较强的穿膜蛋白,说明多种生物化学分离方法及不同质谱分析的综合运用,是解决生物膜蛋白质组学难点的有效途径.
以徐稻3號水稻苗期幼嫩根尖為材料,利用葡聚糖/聚乙二醇兩相分配法純化得到純度達 90% 的質膜組分,使用優化的雙嚮電泳水化液溶解質膜蛋白,通過等電聚焦/十二烷基磺痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠雙嚮電泳 (IEF/SDS-PAGE)分離和基質輔助激光解吸電離串聯飛行時間質譜(MALDI-TOF/TOF)分析,鑒定瞭31箇水稻質膜相關蛋白.結果錶明IEF/SDS-PAGE 雙嚮電泳適閤分離親水性相對較高的膜附著蛋白.進一步利用高鹽和溫和去汙劑對純化的質膜進行洗滌,以降低質膜組分的複雜程度,通過 SDS-PAGE 單嚮電泳分離和液相色譜串聯質譜(LC-MS/MS)分析,鑒定瞭 8箇質膜蛋白.經洗滌後的質膜組分複雜度顯著降低,SDS-PAGE 中的蛋白條帶隻包含1～2 種蛋白,且主要為疏水性較彊的穿膜蛋白,說明多種生物化學分離方法及不同質譜分析的綜閤運用,是解決生物膜蛋白質組學難點的有效途徑.
이서도3호수도묘기유눈근첨위재료,이용포취당/취을이순량상분배법순화득도순도체 90% 적질막조분,사용우화적쌍향전영수화액용해질막단백,통과등전취초/십이완기광산납-취병희선알응효쌍향전영 (IEF/SDS-PAGE)분리화기질보조격광해흡전리천련비행시간질보(MALDI-TOF/TOF)분석,감정료31개수도질막상관단백.결과표명IEF/SDS-PAGE 쌍향전영괄합분리친수성상대교고적막부착단백.진일보이용고염화온화거오제대순화적질막진행세조,이강저질막조분적복잡정도,통과 SDS-PAGE 단향전영분리화액상색보천련질보(LC-MS/MS)분석,감정료 8개질막단백.경세조후적질막조분복잡도현저강저,SDS-PAGE 중적단백조대지포함1～2 충단백,차주요위소수성교강적천막단백,설명다충생물화학분리방법급불동질보분석적종합운용,시해결생물막단백질조학난점적유효도경.
