中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2008年
9期
1-6
,共6页
焦国慧%代红胜%张灼寒%曾彬%刘昱%张园%杨荣存
焦國慧%代紅勝%張灼寒%曾彬%劉昱%張園%楊榮存
초국혜%대홍성%장작한%증빈%류욱%장완%양영존
免疫调节%MyD88缺失突变%树突细胞
免疫調節%MyD88缺失突變%樹突細胞
면역조절%MyD88결실돌변%수돌세포
利用重组PCR的方法,克隆并构建MyD88和MyD88aa155-171功能区缺失(MyD88Δ155-171)载体,转染免疫相关细胞并筛选获得稳定细胞系.报告基因实验结果显示MyD88MyD88Δ155-171功能区缺失能够抑制转录因子NF-κB和AP-1的活性,在不同Toll样受体(TLR)配体刺激后,转染MyD88Δ155-171的细胞表面分子的表达低于MyD88正常表达的细胞,并且抑制表面分子CD86和B7H1在TLR配体刺激后的上调.同时,多细胞因子分析系统的检测结果表明,给予TLR配体刺激之后,MyD88-/-树突细胞表达低水平的细胞因子,转染MyD88可以使细胞因子表达明显增加,而仅表达MyD88Δ155-171可以明显影响IL-12,IFN-γ的表达.以上结果表明MyD88功能区缺失影响免疫相关细胞表面分子和细胞因子的表达及Toll 样受体信号的传递,其在细胞内信号系统的具体作用机制还需进一步证实.
利用重組PCR的方法,剋隆併構建MyD88和MyD88aa155-171功能區缺失(MyD88Δ155-171)載體,轉染免疫相關細胞併篩選穫得穩定細胞繫.報告基因實驗結果顯示MyD88MyD88Δ155-171功能區缺失能夠抑製轉錄因子NF-κB和AP-1的活性,在不同Toll樣受體(TLR)配體刺激後,轉染MyD88Δ155-171的細胞錶麵分子的錶達低于MyD88正常錶達的細胞,併且抑製錶麵分子CD86和B7H1在TLR配體刺激後的上調.同時,多細胞因子分析繫統的檢測結果錶明,給予TLR配體刺激之後,MyD88-/-樹突細胞錶達低水平的細胞因子,轉染MyD88可以使細胞因子錶達明顯增加,而僅錶達MyD88Δ155-171可以明顯影響IL-12,IFN-γ的錶達.以上結果錶明MyD88功能區缺失影響免疫相關細胞錶麵分子和細胞因子的錶達及Toll 樣受體信號的傳遞,其在細胞內信號繫統的具體作用機製還需進一步證實.
이용중조PCR적방법,극륭병구건MyD88화MyD88aa155-171공능구결실(MyD88Δ155-171)재체,전염면역상관세포병사선획득은정세포계.보고기인실험결과현시MyD88MyD88Δ155-171공능구결실능구억제전록인자NF-κB화AP-1적활성,재불동Toll양수체(TLR)배체자격후,전염MyD88Δ155-171적세포표면분자적표체저우MyD88정상표체적세포,병차억제표면분자CD86화B7H1재TLR배체자격후적상조.동시,다세포인자분석계통적검측결과표명,급여TLR배체자격지후,MyD88-/-수돌세포표체저수평적세포인자,전염MyD88가이사세포인자표체명현증가,이부표체MyD88Δ155-171가이명현영향IL-12,IFN-γ적표체.이상결과표명MyD88공능구결실영향면역상관세포표면분자화세포인자적표체급Toll 양수체신호적전체,기재세포내신호계통적구체작용궤제환수진일보증실.
