福建农业学报
福建農業學報
복건농업학보
FUJIAN JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2009年
5期
396-399
,共4页
王劭%陈少莺%林锋强%程晓霞%朱小丽%陈仕龙%欧阳岁东
王劭%陳少鶯%林鋒彊%程曉霞%硃小麗%陳仕龍%歐暘歲東
왕소%진소앵%림봉강%정효하%주소려%진사룡%구양세동
番鸭呼肠孤病毒%σC蛋白%pMAL-p2X%原核表达
番鴨呼腸孤病毒%σC蛋白%pMAL-p2X%原覈錶達
번압호장고병독%σC단백%pMAL-p2X%원핵표체
根据Genbank中MDRV 89026毒株S4基因序列设计引物,通过RT-PCR获得番鸭呼肠孤病毒MW9710株σC 蛋白基因,将此σC 蛋白基因插入原核表达载体pMAL-p2X中,得到重组表达质粒(pMAL-p2XσC)并转化大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导后能高效表达,SDS-PAGE和Western-blot检测结果发现表达的σC蛋白分子质量约为72 kDa,并以可溶性蛋白和包涵体2种形式同时存在,且具有良好的反应原性.原核表达的可溶性σC蛋白为进一步开展抗原表位和诊断试剂盒研究奠定了基础.
根據Genbank中MDRV 89026毒株S4基因序列設計引物,通過RT-PCR穫得番鴨呼腸孤病毒MW9710株σC 蛋白基因,將此σC 蛋白基因插入原覈錶達載體pMAL-p2X中,得到重組錶達質粒(pMAL-p2XσC)併轉化大腸桿菌BL21(DE3)中,經IPTG誘導後能高效錶達,SDS-PAGE和Western-blot檢測結果髮現錶達的σC蛋白分子質量約為72 kDa,併以可溶性蛋白和包涵體2種形式同時存在,且具有良好的反應原性.原覈錶達的可溶性σC蛋白為進一步開展抗原錶位和診斷試劑盒研究奠定瞭基礎.
근거Genbank중MDRV 89026독주S4기인서렬설계인물,통과RT-PCR획득번압호장고병독MW9710주σC 단백기인,장차σC 단백기인삽입원핵표체재체pMAL-p2X중,득도중조표체질립(pMAL-p2XσC)병전화대장간균BL21(DE3)중,경IPTG유도후능고효표체,SDS-PAGE화Western-blot검측결과발현표체적σC단백분자질량약위72 kDa,병이가용성단백화포함체2충형식동시존재,차구유량호적반응원성.원핵표체적가용성σC단백위진일보개전항원표위화진단시제합연구전정료기출.
