中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2011年
1期
107-113
,共7页
明磊国%陈克明%葛宝丰%马慧萍%翟远坤
明磊國%陳剋明%葛寶豐%馬慧萍%翟遠坤
명뢰국%진극명%갈보봉%마혜평%적원곤
骨髓基质干细胞%分化%8-异戊烯基柑橘素%碱性磷酸酶%碱性成纤维细胞生长因子%胰岛素样生长因子%骨形态发生蛋白%Ⅰ型胶原%Osterix%Runx-2
骨髓基質榦細胞%分化%8-異戊烯基柑橘素%堿性燐痠酶%堿性成纖維細胞生長因子%胰島素樣生長因子%骨形態髮生蛋白%Ⅰ型膠原%Osterix%Runx-2
골수기질간세포%분화%8-이무희기감귤소%감성린산매%감성성섬유세포생장인자%이도소양생장인자%골형태발생단백%Ⅰ형효원%Osterix%Runx-2
目的 研究8-异戊烯基柑橘素对体外培养大鼠骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)的增殖与成骨性分化的影响.方法 取大鼠股骨及胫骨全骨髓,利用全骨髓培养法培养于含体积分数为10% FBS的DMEM-F12培养液中.以碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)为指标,96孔板梯度筛选作用最佳浓度.增殖分析采用MTT法.以1×10-6 mol·L-1的最佳浓度作用并成骨性诱导(1×10-7 mmol·L-1地塞米松、10 mmol·L-1 β-甘油磷酸钠和50 mg·L-1抗坏血酸)培养的d 4、8、12、16测ALP活性、钙盐沉积量,d 16进行ALP和钙化结节组织化学染色及计数.成骨性诱导后不同时间点提取Total RNA,RT Real-Time PCR法检测bFGF、IGF-1、Osterix、Runx-2、BMP-2及COL-Ⅰ的基因表达情况.结果 8-异戊烯基柑橘素不能促进BMSCs增殖,但8-异戊烯基柑橘素在1×10-6 mol·L-1时能促进其向成骨性分化,表现为提高BMSCs的ALP活性、促进钙盐沉积、增加钙化结节数量、提高bFGF、IGF-1、Osterix、Runx-2、BMP-2及COL-Ⅰ的mRNA表达水平.结论 8-异戊烯基柑橘素可诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,作为促进骨修复和抗骨质疏松的有效成分具有较大的药用价值.
目的 研究8-異戊烯基柑橘素對體外培養大鼠骨髓基質榦細胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)的增殖與成骨性分化的影響.方法 取大鼠股骨及脛骨全骨髓,利用全骨髓培養法培養于含體積分數為10% FBS的DMEM-F12培養液中.以堿性燐痠酶(alkaline phosphatase,ALP)為指標,96孔闆梯度篩選作用最佳濃度.增殖分析採用MTT法.以1×10-6 mol·L-1的最佳濃度作用併成骨性誘導(1×10-7 mmol·L-1地塞米鬆、10 mmol·L-1 β-甘油燐痠鈉和50 mg·L-1抗壞血痠)培養的d 4、8、12、16測ALP活性、鈣鹽沉積量,d 16進行ALP和鈣化結節組織化學染色及計數.成骨性誘導後不同時間點提取Total RNA,RT Real-Time PCR法檢測bFGF、IGF-1、Osterix、Runx-2、BMP-2及COL-Ⅰ的基因錶達情況.結果 8-異戊烯基柑橘素不能促進BMSCs增殖,但8-異戊烯基柑橘素在1×10-6 mol·L-1時能促進其嚮成骨性分化,錶現為提高BMSCs的ALP活性、促進鈣鹽沉積、增加鈣化結節數量、提高bFGF、IGF-1、Osterix、Runx-2、BMP-2及COL-Ⅰ的mRNA錶達水平.結論 8-異戊烯基柑橘素可誘導骨髓間充質榦細胞嚮成骨細胞分化,作為促進骨脩複和抗骨質疏鬆的有效成分具有較大的藥用價值.
목적 연구8-이무희기감귤소대체외배양대서골수기질간세포(bone marrow stromal cells,BMSCs)적증식여성골성분화적영향.방법 취대서고골급경골전골수,이용전골수배양법배양우함체적분수위10% FBS적DMEM-F12배양액중.이감성린산매(alkaline phosphatase,ALP)위지표,96공판제도사선작용최가농도.증식분석채용MTT법.이1×10-6 mol·L-1적최가농도작용병성골성유도(1×10-7 mmol·L-1지새미송、10 mmol·L-1 β-감유린산납화50 mg·L-1항배혈산)배양적d 4、8、12、16측ALP활성、개염침적량,d 16진행ALP화개화결절조직화학염색급계수.성골성유도후불동시간점제취Total RNA,RT Real-Time PCR법검측bFGF、IGF-1、Osterix、Runx-2、BMP-2급COL-Ⅰ적기인표체정황.결과 8-이무희기감귤소불능촉진BMSCs증식,단8-이무희기감귤소재1×10-6 mol·L-1시능촉진기향성골성분화,표현위제고BMSCs적ALP활성、촉진개염침적、증가개화결절수량、제고bFGF、IGF-1、Osterix、Runx-2、BMP-2급COL-Ⅰ적mRNA표체수평.결론 8-이무희기감귤소가유도골수간충질간세포향성골세포분화,작위촉진골수복화항골질소송적유효성분구유교대적약용개치.
