武警医学院学报
武警醫學院學報
무경의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE CPAPF
2010年
10期
768-771,封3
,共5页
乳酸菌%同源重组%ThyA
乳痠菌%同源重組%ThyA
유산균%동원중조%ThyA
[目的]构建乳酸菌同源重组载体,实现外源基因在乳酸菌中的整合型表达.[方法]根据乳酸菌L.lactis MG1363全基因组中ThyA基因序列设计引物,PCR扩增乳酸菌基因组中ThnyA基因起始密码上游及终止密码下游约1000bp的基因序列,将获得的目的基因依次克隆至载体pMUTIN4中,以琼脂糖凝胶电泳检测目的条带,以双酶切技术、DNA测序予以确证.[结果]琼脂糖凝胶电泳结果显示,目的基因成功扩增,双酶切及DNA测序结果证实,成功构建了同源重组载体pThyA-up-down.[结论]乳酸菌同源重组载体pThyA-up-down为实现外源基因在乳酸菌中的非抗性、整合型表达奠定了基础.
[目的]構建乳痠菌同源重組載體,實現外源基因在乳痠菌中的整閤型錶達.[方法]根據乳痠菌L.lactis MG1363全基因組中ThyA基因序列設計引物,PCR擴增乳痠菌基因組中ThnyA基因起始密碼上遊及終止密碼下遊約1000bp的基因序列,將穫得的目的基因依次剋隆至載體pMUTIN4中,以瓊脂糖凝膠電泳檢測目的條帶,以雙酶切技術、DNA測序予以確證.[結果]瓊脂糖凝膠電泳結果顯示,目的基因成功擴增,雙酶切及DNA測序結果證實,成功構建瞭同源重組載體pThyA-up-down.[結論]乳痠菌同源重組載體pThyA-up-down為實現外源基因在乳痠菌中的非抗性、整閤型錶達奠定瞭基礎.
[목적]구건유산균동원중조재체,실현외원기인재유산균중적정합형표체.[방법]근거유산균L.lactis MG1363전기인조중ThyA기인서렬설계인물,PCR확증유산균기인조중ThnyA기인기시밀마상유급종지밀마하유약1000bp적기인서렬,장획득적목적기인의차극륭지재체pMUTIN4중,이경지당응효전영검측목적조대,이쌍매절기술、DNA측서여이학증.[결과]경지당응효전영결과현시,목적기인성공확증,쌍매절급DNA측서결과증실,성공구건료동원중조재체pThyA-up-down.[결론]유산균동원중조재체pThyA-up-down위실현외원기인재유산균중적비항성、정합형표체전정료기출.
