江苏农业科学
江囌農業科學
강소농업과학
JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
2期
88-91
,共4页
准噶尔雅罗鱼%ISSR-PCR%条件优化%适用引物
準噶爾雅囉魚%ISSR-PCR%條件優化%適用引物
준갈이아라어%ISSR-PCR%조건우화%괄용인물
为研究准噶尔雅罗鱼的遗传多样性,对ISSR-PCR的反应条件进行了优化和适合引物的筛选,采用正交设计方法,选用L9(3(4))正交表,以准噶尔雅罗鱼的基因组DNA为模板,对影响PCR反应较大的4个因素:Taq酶、Mg(2+)、dNTPs、引物在3个水平上进行优化试验,得到准噶尔雅罗鱼最优ISSR-PCR反应体系:25μL反应体系中含有1×PCR buffer、0.5 UTaq酶、3.0mmol/LMgCl2、250μmol/LdNTPs、0.75μmol/L引物、DNA模板30 ng.利用优化体系从32条引物中筛选得到13条适用引物,并确定了各引物最佳退火温度.
為研究準噶爾雅囉魚的遺傳多樣性,對ISSR-PCR的反應條件進行瞭優化和適閤引物的篩選,採用正交設計方法,選用L9(3(4))正交錶,以準噶爾雅囉魚的基因組DNA為模闆,對影響PCR反應較大的4箇因素:Taq酶、Mg(2+)、dNTPs、引物在3箇水平上進行優化試驗,得到準噶爾雅囉魚最優ISSR-PCR反應體繫:25μL反應體繫中含有1×PCR buffer、0.5 UTaq酶、3.0mmol/LMgCl2、250μmol/LdNTPs、0.75μmol/L引物、DNA模闆30 ng.利用優化體繫從32條引物中篩選得到13條適用引物,併確定瞭各引物最佳退火溫度.
위연구준갈이아라어적유전다양성,대ISSR-PCR적반응조건진행료우화화괄합인물적사선,채용정교설계방법,선용L9(3(4))정교표,이준갈이아라어적기인조DNA위모판,대영향PCR반응교대적4개인소:Taq매、Mg(2+)、dNTPs、인물재3개수평상진행우화시험,득도준갈이아라어최우ISSR-PCR반응체계:25μL반응체계중함유1×PCR buffer、0.5 UTaq매、3.0mmol/LMgCl2、250μmol/LdNTPs、0.75μmol/L인물、DNA모판30 ng.이용우화체계종32조인물중사선득도13조괄용인물,병학정료각인물최가퇴화온도.
