中国医科大学学报
中國醫科大學學報
중국의과대학학보
JOURNAL OF CHINA MEDICAL UNIVERSITY
2011年
10期
897-901
,共5页
脂肪干细胞%骨形态发生蛋白7%血管内皮生长因子%成骨细胞
脂肪榦細胞%骨形態髮生蛋白7%血管內皮生長因子%成骨細胞
지방간세포%골형태발생단백7%혈관내피생장인자%성골세포
探讨脂肪干细胞经低浓度骨形态发生蛋白7( BMP-7)及血管内皮生长因子(VEGF)短期诱导后骨细胞方向的分化情况.方法 无菌切取成年Wistar大鼠腹股沟处脂肪,Ⅰ型胶原酶消化法体外分离培养脂肪干细胞,分为4组:各组均加入含10%FBS的DMEM培养基,0.1 μmol/L地塞米松,50 μmol/L维生素C,10 mmol/L β-甘油磷酸钠,100 U/mL青霉素,100 U/mL链霉素；在此基础上,第1组加BMP-7和VEGF(各5 ng/mL);第2组加BMP-7( 10 ng/mL)；第3组加VEGF( 10 ng/mL);另设第4组(空白组),加高糖DMEM.每3d更换培养基.至1,5,7,10,14 d观察细胞生长及转化情况,通过免疫组化、ALP染色、茜素红钙结节染色及MTT等检测不同组别诱导的成骨细胞.结果 细胞计数、MTT、ALP活性检测及免疫组化灰度值检测证实4组诱导液诱导脂肪干细胞向成骨细胞分化的能力:BMP-7+VEGF组＞BMP-7组＞VEGF组＞空白组.结论 与单独使用BMP-7、VEGF或基础培养基相比,BMP-7联合VEGF有加快脂肪干细胞向成骨细胞分化的能力.
探討脂肪榦細胞經低濃度骨形態髮生蛋白7( BMP-7)及血管內皮生長因子(VEGF)短期誘導後骨細胞方嚮的分化情況.方法 無菌切取成年Wistar大鼠腹股溝處脂肪,Ⅰ型膠原酶消化法體外分離培養脂肪榦細胞,分為4組:各組均加入含10%FBS的DMEM培養基,0.1 μmol/L地塞米鬆,50 μmol/L維生素C,10 mmol/L β-甘油燐痠鈉,100 U/mL青黴素,100 U/mL鏈黴素；在此基礎上,第1組加BMP-7和VEGF(各5 ng/mL);第2組加BMP-7( 10 ng/mL)；第3組加VEGF( 10 ng/mL);另設第4組(空白組),加高糖DMEM.每3d更換培養基.至1,5,7,10,14 d觀察細胞生長及轉化情況,通過免疫組化、ALP染色、茜素紅鈣結節染色及MTT等檢測不同組彆誘導的成骨細胞.結果 細胞計數、MTT、ALP活性檢測及免疫組化灰度值檢測證實4組誘導液誘導脂肪榦細胞嚮成骨細胞分化的能力:BMP-7+VEGF組＞BMP-7組＞VEGF組＞空白組.結論 與單獨使用BMP-7、VEGF或基礎培養基相比,BMP-7聯閤VEGF有加快脂肪榦細胞嚮成骨細胞分化的能力.
탐토지방간세포경저농도골형태발생단백7( BMP-7)급혈관내피생장인자(VEGF)단기유도후골세포방향적분화정황.방법 무균절취성년Wistar대서복고구처지방,Ⅰ형효원매소화법체외분리배양지방간세포,분위4조:각조균가입함10%FBS적DMEM배양기,0.1 μmol/L지새미송,50 μmol/L유생소C,10 mmol/L β-감유린산납,100 U/mL청매소,100 U/mL련매소；재차기출상,제1조가BMP-7화VEGF(각5 ng/mL);제2조가BMP-7( 10 ng/mL)；제3조가VEGF( 10 ng/mL);령설제4조(공백조),가고당DMEM.매3d경환배양기.지1,5,7,10,14 d관찰세포생장급전화정황,통과면역조화、ALP염색、천소홍개결절염색급MTT등검측불동조별유도적성골세포.결과 세포계수、MTT、ALP활성검측급면역조화회도치검측증실4조유도액유도지방간세포향성골세포분화적능력:BMP-7+VEGF조＞BMP-7조＞VEGF조＞공백조.결론 여단독사용BMP-7、VEGF혹기출배양기상비,BMP-7연합VEGF유가쾌지방간세포향성골세포분화적능력.
