心肺血管病杂志
心肺血管病雜誌
심폐혈관병잡지
JOURNAL OF CARDIOVASCULAR AND PULMONARY DISEASES
2012年
3期
328-332
,共5页
慈维苹%刘文娴%李鹏%盛瑾
慈維蘋%劉文嫻%李鵬%盛瑾
자유평%류문한%리붕%성근
晚期内皮祖细胞%心肌细胞%增殖%凋亡%血管内皮生长因子
晚期內皮祖細胞%心肌細胞%增殖%凋亡%血管內皮生長因子
만기내피조세포%심기세포%증식%조망%혈관내피생장인자
目的:研究晚期内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)和心肌细胞(cardiomyocyte,CM)在非接触条件下共培养对CM细胞增殖、凋亡功能的影响,并分析其相关机制.方法:采用密度梯度法从大鼠骨髓获取单个核细胞,培养28 d,FITC-UEA-I、Dil-acLDL和DAPI三染色鉴定为晚期EPCs.分别吸取晚期EPCs和乳大鼠CM,按0∶1,1∶1,5∶1,10∶1的细胞比率分别植于Transwell小室,下室植入晚期EPCs,上室植入CM.将晚期EPCs与CM非接触共培养12 ～ 48 h,分别采用MTT比色法、Tunel法检测其增殖、凋亡功能.并于晚期EPCs与CM共培养48 h后,应用ELISA试剂盒检测不同比率组(0∶1 ～10∶1)上清液中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)浓度.结果:体外培养7d时,EPCs细胞呈典型长梭形；28 d时,呈铺路石样,并可摄取FITC -UEA-I、Dil-acLDL.晚期EPCs可促进共培养的CM增殖,减少凋亡.随着晚期EPCs与CM细胞比率的增加,不同共培养时间组的CM增殖功能均明显增强(P＜0.05),凋亡功能均明显降低(P＜0.05)；且随共培养时间延长,不同比率组的CM增殖功能亦均明显增强(P＜0.05),凋亡功能均明显降低(P＜0.05)；当晚期EPCs与CM比率为10∶1、共培养48 h时,CM增殖功能最强(P=0.00),凋亡最低(P=0.00).当晚期EPCs与CM共培养48 h后,随晚期EPCs/CM数量比率的增加上清液中VEGF浓度明显增加(P＜0.05).结论:在非接触共培养条件下,随着晚期EPCs与CM比率的增加以及共培养时间的延长,CM增殖明显增强、凋亡明显降低；可能与晚期EPCs通过分泌VEGF从而改善CM增殖、凋亡功能有关.
目的:研究晚期內皮祖細胞(endothelial progenitor cells,EPCs)和心肌細胞(cardiomyocyte,CM)在非接觸條件下共培養對CM細胞增殖、凋亡功能的影響,併分析其相關機製.方法:採用密度梯度法從大鼠骨髓穫取單箇覈細胞,培養28 d,FITC-UEA-I、Dil-acLDL和DAPI三染色鑒定為晚期EPCs.分彆吸取晚期EPCs和乳大鼠CM,按0∶1,1∶1,5∶1,10∶1的細胞比率分彆植于Transwell小室,下室植入晚期EPCs,上室植入CM.將晚期EPCs與CM非接觸共培養12 ～ 48 h,分彆採用MTT比色法、Tunel法檢測其增殖、凋亡功能.併于晚期EPCs與CM共培養48 h後,應用ELISA試劑盒檢測不同比率組(0∶1 ～10∶1)上清液中血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)濃度.結果:體外培養7d時,EPCs細胞呈典型長梭形；28 d時,呈鋪路石樣,併可攝取FITC -UEA-I、Dil-acLDL.晚期EPCs可促進共培養的CM增殖,減少凋亡.隨著晚期EPCs與CM細胞比率的增加,不同共培養時間組的CM增殖功能均明顯增彊(P＜0.05),凋亡功能均明顯降低(P＜0.05)；且隨共培養時間延長,不同比率組的CM增殖功能亦均明顯增彊(P＜0.05),凋亡功能均明顯降低(P＜0.05)；噹晚期EPCs與CM比率為10∶1、共培養48 h時,CM增殖功能最彊(P=0.00),凋亡最低(P=0.00).噹晚期EPCs與CM共培養48 h後,隨晚期EPCs/CM數量比率的增加上清液中VEGF濃度明顯增加(P＜0.05).結論:在非接觸共培養條件下,隨著晚期EPCs與CM比率的增加以及共培養時間的延長,CM增殖明顯增彊、凋亡明顯降低；可能與晚期EPCs通過分泌VEGF從而改善CM增殖、凋亡功能有關.
목적:연구만기내피조세포(endothelial progenitor cells,EPCs)화심기세포(cardiomyocyte,CM)재비접촉조건하공배양대CM세포증식、조망공능적영향,병분석기상관궤제.방법:채용밀도제도법종대서골수획취단개핵세포,배양28 d,FITC-UEA-I、Dil-acLDL화DAPI삼염색감정위만기EPCs.분별흡취만기EPCs화유대서CM,안0∶1,1∶1,5∶1,10∶1적세포비솔분별식우Transwell소실,하실식입만기EPCs,상실식입CM.장만기EPCs여CM비접촉공배양12 ～ 48 h,분별채용MTT비색법、Tunel법검측기증식、조망공능.병우만기EPCs여CM공배양48 h후,응용ELISA시제합검측불동비솔조(0∶1 ～10∶1)상청액중혈관내피생장인자(vascular endothelial growth factor,VEGF)농도.결과:체외배양7d시,EPCs세포정전형장사형；28 d시,정포로석양,병가섭취FITC -UEA-I、Dil-acLDL.만기EPCs가촉진공배양적CM증식,감소조망.수착만기EPCs여CM세포비솔적증가,불동공배양시간조적CM증식공능균명현증강(P＜0.05),조망공능균명현강저(P＜0.05)；차수공배양시간연장,불동비솔조적CM증식공능역균명현증강(P＜0.05),조망공능균명현강저(P＜0.05)；당만기EPCs여CM비솔위10∶1、공배양48 h시,CM증식공능최강(P=0.00),조망최저(P=0.00).당만기EPCs여CM공배양48 h후,수만기EPCs/CM수량비솔적증가상청액중VEGF농도명현증가(P＜0.05).결론:재비접촉공배양조건하,수착만기EPCs여CM비솔적증가이급공배양시간적연장,CM증식명현증강、조망명현강저；가능여만기EPCs통과분비VEGF종이개선CM증식、조망공능유관.
