中华微生物学和免疫学杂志
中華微生物學和免疫學雜誌
중화미생물학화면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2007年
7期
669-674
,共6页
吴萌%闫静辉%张小兵%李春生%陈英珠%程华%李亚璞%邢玉敏
吳萌%閆靜輝%張小兵%李春生%陳英珠%程華%李亞璞%邢玉敏
오맹%염정휘%장소병%리춘생%진영주%정화%리아박%형옥민
磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3%肿瘤标志物%表位肽预测%抗原亲和层析%多克隆抗体
燐脂酰肌醇蛋白聚糖-3%腫瘤標誌物%錶位肽預測%抗原親和層析%多剋隆抗體
린지선기순단백취당-3%종류표지물%표위태예측%항원친화층석%다극륭항체
目的 研制针对肝细胞癌标志物磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)的高特异抗体.方法 用Biosun软件预测和分析GPC3的抗原表位肽,人工合成选定的表位肽,与载体蛋白KLH偶联后免疫新西兰大白兔制备抗血清.以抗原亲和层析法制取高纯抗GPC3抗体,对肝癌细胞株HepG2和胎盘组织进行Westem blot印迹及对肝癌组织切片进行免疫组化染色,并用夹心ELISA对肝癌患者的血清进行了检测.结果 选定并合成两条抗原表位肽(命名为GPC3-P1和GPC3-P2),取得高效价抗血清(分别为1:204 800和1:409 600).两种抗GPC3抗体纯度均达到95%以上,在Western blot印迹能特异性地检测到GPC3;在免疫组化染色中均与肿瘤组织GPC3特异性结合,在正常组织中没有染色;夹心ELISA可以检测到肝癌患者血清中的GPC3.结论 该两种抗GPC3不同表位的高特异抗体可用于研制相关肿瘤检测试剂盒.
目的 研製針對肝細胞癌標誌物燐脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)的高特異抗體.方法 用Biosun軟件預測和分析GPC3的抗原錶位肽,人工閤成選定的錶位肽,與載體蛋白KLH偶聯後免疫新西蘭大白兔製備抗血清.以抗原親和層析法製取高純抗GPC3抗體,對肝癌細胞株HepG2和胎盤組織進行Westem blot印跡及對肝癌組織切片進行免疫組化染色,併用夾心ELISA對肝癌患者的血清進行瞭檢測.結果 選定併閤成兩條抗原錶位肽(命名為GPC3-P1和GPC3-P2),取得高效價抗血清(分彆為1:204 800和1:409 600).兩種抗GPC3抗體純度均達到95%以上,在Western blot印跡能特異性地檢測到GPC3;在免疫組化染色中均與腫瘤組織GPC3特異性結閤,在正常組織中沒有染色;夾心ELISA可以檢測到肝癌患者血清中的GPC3.結論 該兩種抗GPC3不同錶位的高特異抗體可用于研製相關腫瘤檢測試劑盒.
목적 연제침대간세포암표지물린지선기순단백취당-3(GPC3)적고특이항체.방법 용Biosun연건예측화분석GPC3적항원표위태,인공합성선정적표위태,여재체단백KLH우련후면역신서란대백토제비항혈청.이항원친화층석법제취고순항GPC3항체,대간암세포주HepG2화태반조직진행Westem blot인적급대간암조직절편진행면역조화염색,병용협심ELISA대간암환자적혈청진행료검측.결과 선정병합성량조항원표위태(명명위GPC3-P1화GPC3-P2),취득고효개항혈청(분별위1:204 800화1:409 600).량충항GPC3항체순도균체도95%이상,재Western blot인적능특이성지검측도GPC3;재면역조화염색중균여종류조직GPC3특이성결합,재정상조직중몰유염색;협심ELISA가이검측도간암환자혈청중적GPC3.결론 해량충항GPC3불동표위적고특이항체가용우연제상관종류검측시제합.
