CAJ | 학술논문

目的分离培养人体脂肪基质细胞,经成软骨定向诱导后复合藻酸盐凝胶,研究其异位软骨生成能力.方法将脂肪抽吸术获取的人体脂肪机械分割,通过I型胶原酶消化后得到脂肪基质细胞,在BGJb培养基中原代培养10 d,消化传代后在含体积分数10%FBS及6.25 mg/L胰岛素,10μg/L TGF-β1,50 mg/L维生素C的DMEM/F12培养基中诱导培养14 d,获取的细胞按1×1010/L的细胞密度与质量分数为1.2%的藻酸钠复合,加入102mmoL/L CaCl2充分混匀,使之交联,将细胞-藻酸盐凝胶1 ml注入每只体重为25g的BALB/C裸小鼠背部皮下(共4只),同时在裸小鼠臀部两侧皮下各注入相同量的无细胞藻酸盐及单纯细胞作为自身对照.术后4、8周各处死2只动物,取材固定、脱钙、包埋后切片染色,镜下观察.结果经连续诱导培养14 d的脂肪基质细胞已具明显成骨表型(细胞基质中富含硫酸软骨素及Ⅱ型胶原).4、8周时,注射细胞-藻酸盐凝胶标本均显示明显的软骨形成,肥大的软骨细胞位于富含硫酸蛋白多糖的基质中,而自身对照注射的无细胞藻酸盐及单纯细胞在术后3～4周已完全吸收.结论脂肪基质细胞经过诱导培养后具有向软骨细胞表型分化的潜能.
목적분리배양인체지방기질세포,경성연골정향유도후복합조산염응효,연구기이위연골생성능력.방법장지방추흡술획취적인체지방궤계분할,통과I형효원매소화후득도지방기질세포,재BGJb배양기중원대배양10 d,소화전대후재함체적분수10%FBS급6.25 mg/L이도소,10μg/L TGF-β1,50 mg/L유생소C적DMEM/F12배양기중유도배양14 d,획취적세포안1×1010/L적세포밀도여질량분수위1.2%적조산납복합,가입102mmoL/L CaCl2충분혼균,사지교련,장세포-조산염응효1 ml주입매지체중위25g적BALB/C라소서배부피하(공4지),동시재라소서둔부량측피하각주입상동량적무세포조산염급단순세포작위자신대조.술후4、8주각처사2지동물,취재고정、탈개、포매후절편염색,경하관찰.결과경련속유도배양14 d적지방기질세포이구명현성골표형(세포기질중부함류산연골소급Ⅱ형효원).4、8주시,주사세포-조산염응효표본균현시명현적연골형성,비대적연골세포위우부함류산단백다당적기질중,이자신대조주사적무세포조산염급단순세포재술후3～4주이완전흡수.결론지방기질세포경과유도배양후구유향연골세포표형분화적잠능.