河北医科大学学报
河北醫科大學學報
하북의과대학학보
JOURNAL OF HEBEI MEDICAL UNIVERSITY
2006年
5期
321-326
,共6页
米立国%高英%孟宪敏%丁金凤
米立國%高英%孟憲敏%丁金鳳
미입국%고영%맹헌민%정금봉
金属蛋白酶类组织抑制剂%腺病毒科%基因
金屬蛋白酶類組織抑製劑%腺病毒科%基因
금속단백매류조직억제제%선병독과%기인
目的 克隆细胞外基质金属蛋白酶组织抑制因子4(tissue inhibitor-4 of metalloproteinases,TIMP-4)基因,构建包装携带TIMP-4基因的重组腺病毒载体(Ad/T4),为基因治疗血管再狭窄的实验研究打下基础.方法 以人心脏cDNA文库为模板,应用PCR克隆TIMP-4基因,经DNA测序确定克隆结果.构建具有强启动子CMV,携带TIMP-4和报告基因GFP的穿梭质粒pAdTrack-T4,利用AdEassy系统,在大肠杆菌BJ5183经同源重组产生重组腺病毒质粒pAd/T4.脂质体介导转染293细胞,包装重组腺病毒载体(Ad/T4).结果 克隆出含TIMP-4全部编码序列的cDNA片断,并通过亚克隆和同源重组等将其重组入腺病毒,构建包装了重组腺病毒载体Ad/T4.结论 Ad/T4中含有TIMP-4和GFP的完整表达盒,可用于基因治疗的实验.
目的 剋隆細胞外基質金屬蛋白酶組織抑製因子4(tissue inhibitor-4 of metalloproteinases,TIMP-4)基因,構建包裝攜帶TIMP-4基因的重組腺病毒載體(Ad/T4),為基因治療血管再狹窄的實驗研究打下基礎.方法 以人心髒cDNA文庫為模闆,應用PCR剋隆TIMP-4基因,經DNA測序確定剋隆結果.構建具有彊啟動子CMV,攜帶TIMP-4和報告基因GFP的穿梭質粒pAdTrack-T4,利用AdEassy繫統,在大腸桿菌BJ5183經同源重組產生重組腺病毒質粒pAd/T4.脂質體介導轉染293細胞,包裝重組腺病毒載體(Ad/T4).結果 剋隆齣含TIMP-4全部編碼序列的cDNA片斷,併通過亞剋隆和同源重組等將其重組入腺病毒,構建包裝瞭重組腺病毒載體Ad/T4.結論 Ad/T4中含有TIMP-4和GFP的完整錶達盒,可用于基因治療的實驗.
목적 극륭세포외기질금속단백매조직억제인자4(tissue inhibitor-4 of metalloproteinases,TIMP-4)기인,구건포장휴대TIMP-4기인적중조선병독재체(Ad/T4),위기인치료혈관재협착적실험연구타하기출.방법 이인심장cDNA문고위모판,응용PCR극륭TIMP-4기인,경DNA측서학정극륭결과.구건구유강계동자CMV,휴대TIMP-4화보고기인GFP적천사질립pAdTrack-T4,이용AdEassy계통,재대장간균BJ5183경동원중조산생중조선병독질립pAd/T4.지질체개도전염293세포,포장중조선병독재체(Ad/T4).결과 극륭출함TIMP-4전부편마서렬적cDNA편단,병통과아극륭화동원중조등장기중조입선병독,구건포장료중조선병독재체Ad/T4.결론 Ad/T4중함유TIMP-4화GFP적완정표체합,가용우기인치료적실험.
