中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2006年
5期
461-463,467
,共4页
张文艳%楼朝平%朱可彤%张帆%姜春来%吴永革%于湘晖%孔维
張文豔%樓朝平%硃可彤%張帆%薑春來%吳永革%于湘暉%孔維
장문염%루조평%주가동%장범%강춘래%오영혁%우상휘%공유
人免疫缺陷病毒%Vif蛋白%Cullin5蛋白
人免疫缺陷病毒%Vif蛋白%Cullin5蛋白
인면역결함병독%Vif단백%Cullin5단백
目的 获得高纯度的Vif-△N28和Cullin5-N138蛋白.方法 以Vif/VR1o12质粒为模板,PCR扩增出Vif-△N28基因并插入pRSETB质粒.将构建的原核表达载体Vif-△N28/pRSETB以及已有的Cullin5-N138/pRSETB质粒分别转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,产物经Ni-NTA离子纯化柱纯化、复性.结果 所表达的Vif-△N28和Cullin5-N138蛋白约占各自菌体总蛋白的20%,纯化后蛋白纯度均可达90%以上.结论 已成功构建了Vif-△N28原核表达质粒,并在大肠杆菌中高效表达,获得了可溶性的纯化的Vif-△N28和Cullin5-N138蛋白.
目的 穫得高純度的Vif-△N28和Cullin5-N138蛋白.方法 以Vif/VR1o12質粒為模闆,PCR擴增齣Vif-△N28基因併插入pRSETB質粒.將構建的原覈錶達載體Vif-△N28/pRSETB以及已有的Cullin5-N138/pRSETB質粒分彆轉化大腸桿菌BL21(DE3),經IPTG誘導錶達,產物經Ni-NTA離子純化柱純化、複性.結果 所錶達的Vif-△N28和Cullin5-N138蛋白約佔各自菌體總蛋白的20%,純化後蛋白純度均可達90%以上.結論 已成功構建瞭Vif-△N28原覈錶達質粒,併在大腸桿菌中高效錶達,穫得瞭可溶性的純化的Vif-△N28和Cullin5-N138蛋白.
목적 획득고순도적Vif-△N28화Cullin5-N138단백.방법 이Vif/VR1o12질립위모판,PCR확증출Vif-△N28기인병삽입pRSETB질립.장구건적원핵표체재체Vif-△N28/pRSETB이급이유적Cullin5-N138/pRSETB질립분별전화대장간균BL21(DE3),경IPTG유도표체,산물경Ni-NTA리자순화주순화、복성.결과 소표체적Vif-△N28화Cullin5-N138단백약점각자균체총단백적20%,순화후단백순도균가체90%이상.결론 이성공구건료Vif-△N28원핵표체질립,병재대장간균중고효표체,획득료가용성적순화적Vif-△N28화Cullin5-N138단백.
