中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2007年
7期
17-20
,共4页
史晶%王慧%包士中%侯晓军%荫俊
史晶%王慧%包士中%侯曉軍%蔭俊
사정%왕혜%포사중%후효군%음준
肉毒毒素%受体%MBP融合蛋白%原核表达
肉毒毒素%受體%MBP融閤蛋白%原覈錶達
육독독소%수체%MBP융합단백%원핵표체
旨在构建肉毒毒素蛋白受体sytⅡ N端片段的原核表达载体,并在大肠杆菌pMAL-c2x系统中表达MBP-Syt融合蛋白.根据GenBank中已报道的人syt Ⅱ基因序列,截取N端氨基酸序列,依据大肠杆菌的偏爱密码子,设计引物人工合成全基因,将全长基因克隆至原核表达载体pMAL-c2x中,重组质粒转化大肠杆菌E.coli ER2566,IPTG诱导表达.表达产物经Amylose Resin亲和层析进行纯化,SDS-PAGE和免疫印记对其进行鉴定,并对该蛋白进行活性的初步分析,为进一步研究毒素与受体相互作用的机制奠定基础.
旨在構建肉毒毒素蛋白受體sytⅡ N耑片段的原覈錶達載體,併在大腸桿菌pMAL-c2x繫統中錶達MBP-Syt融閤蛋白.根據GenBank中已報道的人syt Ⅱ基因序列,截取N耑氨基痠序列,依據大腸桿菌的偏愛密碼子,設計引物人工閤成全基因,將全長基因剋隆至原覈錶達載體pMAL-c2x中,重組質粒轉化大腸桿菌E.coli ER2566,IPTG誘導錶達.錶達產物經Amylose Resin親和層析進行純化,SDS-PAGE和免疫印記對其進行鑒定,併對該蛋白進行活性的初步分析,為進一步研究毒素與受體相互作用的機製奠定基礎.
지재구건육독독소단백수체sytⅡ N단편단적원핵표체재체,병재대장간균pMAL-c2x계통중표체MBP-Syt융합단백.근거GenBank중이보도적인syt Ⅱ기인서렬,절취N단안기산서렬,의거대장간균적편애밀마자,설계인물인공합성전기인,장전장기인극륭지원핵표체재체pMAL-c2x중,중조질립전화대장간균E.coli ER2566,IPTG유도표체.표체산물경Amylose Resin친화층석진행순화,SDS-PAGE화면역인기대기진행감정,병대해단백진행활성적초보분석,위진일보연구독소여수체상호작용적궤제전정기출.
