CAJ | 학술논문

目的利用体外培养的乳鼠心肌细胞,观测腺苷A1受体激动剂,R(-)-N6-(2-phenylisopropy1) adenosine(R-PIA)对异丙肾上腺素(Iso)诱导的心肌细胞肥大的抑制作用,并且探讨其作用机制特别是与CaMK Ⅱ表达的关系及对心肌细胞[Ca2+]i瞬间变化的影响.方法新生大鼠心肌细胞分组给药,以10 μmol/L的异丙肾上腺素(β肾上腺素激动剂,β-AR)诱导心肌肥大,观察1 μmol/L的R-PIA的作用以及钙调素激酶Ⅱ特异性抑制剂KN93(0 2 μmol/L)防止腺苷A1受体的激活对心肌肥厚的作用.[3H]亮氨酸leucine标记法测定心肌细胞蛋白合成;Western blot法测细胞核内CaMKⅡδB的表达水平;Till图像测定系统,以Fura-2做荧光标志,观察心肌细胞[Ca2+]i瞬间变化.结果 1 μmol/L的R-PIA可以明显抑制Iso诱导的蛋白合成增加[(974 8±58 6)vs(1220 8±240 5)计数/(min·孔),P<0 01],抑制[Ca2+]i瞬变增加[(189 9±10 7) vs (312 5±8 8)nmol/L,P<0 05]和心肌细胞核内CaMK Ⅱδ B的表达含量增加的作用,该抑制作用可以被A1受体抗拮剂8-cyclopentyl-1, 3-dipropylxanthine(CPDPX)所拮抗.并且当R-PIA与KN93合用时二者有协同抑制作用,其作用较单用KN93组明显[分别为蛋白合成:(R-PIA+KN93合用:758 1±80 7)vs(KN93单用:981 3±184 4),P<0 05;[Ca2+]i瞬变浓度:(R-PIA+KN93合用:169 96±10 02)vs(KN93单用:202 39±16 58),P<0 05].结论在低血清环境下,Iso明显诱导心肌细胞肥大.腺苷通过激动A1受体明显抑制Iso诱导的心肌肥大,其机制可能通过降低心肌细胞[Ca2+]i瞬间变化和减少心肌细胞内CaMKⅡδB的表达.
목적 이용체외배양적유서심기세포,관측선감A1수체격동제,R(-)-N6-(2-phenylisopropy1) adenosine(R-PIA)대이병신상선소(Iso)유도적심기세포비대적억제작용,병차탐토기작용궤제특별시여CaMK Ⅱ표체적관계급대심기세포[Ca2+]i순간변화적영향.방법 신생대서심기세포분조급약,이10 μmol/L적이병신상선소(β신상선소격동제,β-AR)유도심기비대,관찰1 μmol/L적R-PIA적작용이급개조소격매Ⅱ특이성억제제KN93(0 2 μmol/L)방지선감A1수체적격활대심기비후적작용.[3H]량안산leucine표기법측정심기세포단백합성;Western blot법측세포핵내CaMKⅡδB적표체수평;Till도상측정계통,이Fura-2주형광표지,관찰심기세포[Ca2+]i순간변화.결과 1 μmol/L적R-PIA가이명현억제Iso유도적단백합성증가[(974 8±58 6)vs(1220 8±240 5)계수/(min·공),P<0 01],억제[Ca2+]i순변증가[(189 9±10 7) vs (312 5±8 8)nmol/L,P<0 05]화심기세포핵내CaMK Ⅱδ B적표체함량증가적작용,해억제작용가이피A1수체항길제8-cyclopentyl-1, 3-dipropylxanthine(CPDPX)소길항.병차당R-PIA여KN93합용시이자유협동억제작용,기작용교단용KN93조명현[분별위단백합성:(R-PIA+KN93합용:758 1±80 7)vs(KN93단용:981 3±184 4),P<0 05;[Ca2+]i순변농도:(R-PIA+KN93합용:169 96±10 02)vs(KN93단용:202 39±16 58),P<0 05].결론 재저혈청배경하,Iso명현유도심기세포비대.선감통과격동A1수체명현억제Iso유도적심기비대,기궤제가능통과강저심기세포[Ca2+]i순간변화화감소심기세포내CaMKⅡδB적표체.