CAJ | 학술논문

目的:克隆食管癌侵袭转移相关基因Ezrin的转录调控区序列,进行启动子活性鉴定及初步的生物信息学分析.方法:利用在线程序对Ezrin基因可能的转录调控区进行GC含量和CpG岛分析以及转录因子结合位点预测,采用PCR法从食管癌细胞基因组DNA中克隆Ezrin基因-1759/+134和-726/+134区段,构建萤火虫荧光素酶报告基因表达质粒pGLB-hE(-1759/+134)和pGLB-hE(-726/+134),检测所克隆片段的启动子活性.结果:Ezrin基因5'侧翼区为高GC含量区,存在CpG岛,无典型的TATA盒,然而转录因子Spl结合位点却无处不在.与对照质粒pGLB相比,重组质粒pGLB-hE(-726/+134)具有较强的荧光素酶活性,pGLB-hE(-1 759/+134)的荧光素酶活性约是pGLB-hE(-726/+134)的2倍.结论:Ezrin基因的-726/+134区段具有启动子活性,含有Ezrin基因的核心启动子区和调节性启动子区;-1759/-726区段具有增强启动予活性的作用,含有Ezrin基因增强子元件区.
목적:극륭식관암침습전이상관기인Ezrin적전록조공구서렬,진행계동자활성감정급초보적생물신식학분석.방법:이용재선정서대Ezrin기인가능적전록조공구진행GC함량화CpG도분석이급전록인자결합위점예측,채용PCR법종식관암세포기인조DNA중극륭Ezrin기인-1759/+134화-726/+134구단,구건형화충형광소매보고기인표체질립pGLB-hE(-1759/+134)화pGLB-hE(-726/+134),검측소극륭편단적계동자활성.결과:Ezrin기인5'측익구위고GC함량구,존재CpG도,무전형적TATA합,연이전록인자Spl결합위점각무처불재.여대조질립pGLB상비,중조질립pGLB-hE(-726/+134)구유교강적형광소매활성,pGLB-hE(-1 759/+134)적형광소매활성약시pGLB-hE(-726/+134)적2배.결론:Ezrin기인적-726/+134구단구유계동자활성,함유Ezrin기인적핵심계동자구화조절성계동자구;-1759/-726구단구유증강계동여활성적작용,함유Ezrin기인증강자원건구.