南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2011年
10期
1742-1747
,共6页
王玲%单保恩%桑梅香%连易水%王彬%丁春艳
王玲%單保恩%桑梅香%連易水%王彬%丁春豔
왕령%단보은%상매향%련역수%왕빈%정춘염
乳腺癌%基因沉默%miRNA%细胞增殖%细胞凋亡%p65
乳腺癌%基因沉默%miRNA%細胞增殖%細胞凋亡%p65
유선암%기인침묵%miRNA%세포증식%세포조망%p65
目的 利用miRNA靶向沉默p65基因,观察其对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及凋亡的影响.方法 以脂质体LipofectamineTM2000为载体,将针对特异靶点p65基因的miRNA转染入MDA-MB-231细胞.RT-PCR和Western blot法检测p65 mRNA和蛋白表达的变化；MTT法检测细胞增殖；流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡；Western blot法检测凋亡相关因子表达的变化.结果 RT-PCR和Western blot检测结果显示,p65miRNA转染组p65 mRNA及蛋白表达量较对照组显著下降(P＜0.05)；MTT检测结果显示,沉默p65基因后,细胞出现了生长抑制现象；FCM检测结果发现,p65miRNA转染组细胞凋亡率显著增加(P＜0.05).Western blot进一步检测发现,转染组细胞中caspase-3的前体蛋白条带变细,裂解片段条带加深；PARP蛋白出现裂解片段.结论 miRNA靶向沉默p65基因可抑制人乳腺癌细胞增殖,促进细胞凋亡,推测p65基因可能成为乳腺癌基因治疗的一个新靶点.
目的 利用miRNA靶嚮沉默p65基因,觀察其對人乳腺癌細胞MDA-MB-231增殖及凋亡的影響.方法 以脂質體LipofectamineTM2000為載體,將針對特異靶點p65基因的miRNA轉染入MDA-MB-231細胞.RT-PCR和Western blot法檢測p65 mRNA和蛋白錶達的變化；MTT法檢測細胞增殖；流式細胞技術(FCM)檢測細胞凋亡；Western blot法檢測凋亡相關因子錶達的變化.結果 RT-PCR和Western blot檢測結果顯示,p65miRNA轉染組p65 mRNA及蛋白錶達量較對照組顯著下降(P＜0.05)；MTT檢測結果顯示,沉默p65基因後,細胞齣現瞭生長抑製現象；FCM檢測結果髮現,p65miRNA轉染組細胞凋亡率顯著增加(P＜0.05).Western blot進一步檢測髮現,轉染組細胞中caspase-3的前體蛋白條帶變細,裂解片段條帶加深；PARP蛋白齣現裂解片段.結論 miRNA靶嚮沉默p65基因可抑製人乳腺癌細胞增殖,促進細胞凋亡,推測p65基因可能成為乳腺癌基因治療的一箇新靶點.
목적 이용miRNA파향침묵p65기인,관찰기대인유선암세포MDA-MB-231증식급조망적영향.방법 이지질체LipofectamineTM2000위재체,장침대특이파점p65기인적miRNA전염입MDA-MB-231세포.RT-PCR화Western blot법검측p65 mRNA화단백표체적변화；MTT법검측세포증식；류식세포기술(FCM)검측세포조망；Western blot법검측조망상관인자표체적변화.결과 RT-PCR화Western blot검측결과현시,p65miRNA전염조p65 mRNA급단백표체량교대조조현저하강(P＜0.05)；MTT검측결과현시,침묵p65기인후,세포출현료생장억제현상；FCM검측결과발현,p65miRNA전염조세포조망솔현저증가(P＜0.05).Western blot진일보검측발현,전염조세포중caspase-3적전체단백조대변세,렬해편단조대가심；PARP단백출현렬해편단.결론 miRNA파향침묵p65기인가억제인유선암세포증식,촉진세포조망,추측p65기인가능성위유선암기인치료적일개신파점.
