重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2012年
6期
521-523,526
,共4页
何云锋%吴小候%唐伟%王德林%尹志康%蒲军%陈刚
何雲鋒%吳小候%唐偉%王德林%尹誌康%蒲軍%陳剛
하운봉%오소후%당위%왕덕림%윤지강%포군%진강
RNA干扰%细胞周期蛋白依赖激酶4%Delta N p63基因
RNA榦擾%細胞週期蛋白依賴激酶4%Delta N p63基因
RNA간우%세포주기단백의뢰격매4%Delta N p63기인
目的 采用RNA干扰(RNAi)方法,研究当Delta N p63基因的表达沉默后,对人膀胱癌裸鼠皮下移植模型肿瘤的抑制作用,并检测对细胞周期素依赖性激酶4(CDK4)基因和蛋白表达的影响,进一步揭示Delta N p63基因在膀胱肿瘤中的作用机制.方法 首先构建Delta N p63基因特异性短发卡RNA(shRNA)表达质粒,将表达质粒转染至裸鼠皮下移植模型肿瘤瘤体内,比较各组肿瘤体积,光镜下检测肿瘤组织病理学改变,RT-PCR方法检测CKD4基因的表达变化,Western blot和SP免疫组化检测CKD4蛋白表达变化.结果 质粒注射到肿瘤8周后,治疗组、对照组与生理盐水组比较,治疗组与生理盐水组瘤体积比较差异有统计学意义(P<0.01),抑瘤率74.62%.光镜结果显示治疗组肿瘤生长受到明显抑制,细胞核分裂象明显减少,可见坏死和凋亡肿瘤细胞、局部炎症细胞浸润.RT-PCR结果显示治疗组CKD4基因表达降低,蛋白检测结果显示CKD4蛋白表达下降.结论 沉默Delta N p63表达后,可显著抑制人膀胱癌裸鼠肿瘤模型中肿瘤的生长,Delta N p63可能通过抑制CKD4的表达而抑制肿瘤的细胞生长.
目的 採用RNA榦擾(RNAi)方法,研究噹Delta N p63基因的錶達沉默後,對人膀胱癌裸鼠皮下移植模型腫瘤的抑製作用,併檢測對細胞週期素依賴性激酶4(CDK4)基因和蛋白錶達的影響,進一步揭示Delta N p63基因在膀胱腫瘤中的作用機製.方法 首先構建Delta N p63基因特異性短髮卡RNA(shRNA)錶達質粒,將錶達質粒轉染至裸鼠皮下移植模型腫瘤瘤體內,比較各組腫瘤體積,光鏡下檢測腫瘤組織病理學改變,RT-PCR方法檢測CKD4基因的錶達變化,Western blot和SP免疫組化檢測CKD4蛋白錶達變化.結果 質粒註射到腫瘤8週後,治療組、對照組與生理鹽水組比較,治療組與生理鹽水組瘤體積比較差異有統計學意義(P<0.01),抑瘤率74.62%.光鏡結果顯示治療組腫瘤生長受到明顯抑製,細胞覈分裂象明顯減少,可見壞死和凋亡腫瘤細胞、跼部炎癥細胞浸潤.RT-PCR結果顯示治療組CKD4基因錶達降低,蛋白檢測結果顯示CKD4蛋白錶達下降.結論 沉默Delta N p63錶達後,可顯著抑製人膀胱癌裸鼠腫瘤模型中腫瘤的生長,Delta N p63可能通過抑製CKD4的錶達而抑製腫瘤的細胞生長.
목적 채용RNA간우(RNAi)방법,연구당Delta N p63기인적표체침묵후,대인방광암라서피하이식모형종류적억제작용,병검측대세포주기소의뢰성격매4(CDK4)기인화단백표체적영향,진일보게시Delta N p63기인재방광종류중적작용궤제.방법 수선구건Delta N p63기인특이성단발잡RNA(shRNA)표체질립,장표체질립전염지라서피하이식모형종류류체내,비교각조종류체적,광경하검측종류조직병이학개변,RT-PCR방법검측CKD4기인적표체변화,Western blot화SP면역조화검측CKD4단백표체변화.결과 질립주사도종류8주후,치료조、대조조여생리염수조비교,치료조여생리염수조류체적비교차이유통계학의의(P<0.01),억류솔74.62%.광경결과현시치료조종류생장수도명현억제,세포핵분렬상명현감소,가견배사화조망종류세포、국부염증세포침윤.RT-PCR결과현시치료조CKD4기인표체강저,단백검측결과현시CKD4단백표체하강.결론 침묵Delta N p63표체후,가현저억제인방광암라서종류모형중종류적생장,Delta N p63가능통과억제CKD4적표체이억제종류적세포생장.
