中国癌症杂志
中國癌癥雜誌
중국암증잡지
CHINA ONCOLOGY
2012年
7期
505-509
,共5页
李国惠%刘天德%余新%刘秀霞%袁荣发%蒋成行%邵江华
李國惠%劉天德%餘新%劉秀霞%袁榮髮%蔣成行%邵江華
리국혜%류천덕%여신%류수하%원영발%장성행%소강화
Rock2%肝细胞癌%细胞分裂周期素25A%紫外线
Rock2%肝細胞癌%細胞分裂週期素25A%紫外線
Rock2%간세포암%세포분렬주기소25A%자외선
背景与目的:Rock2基因在肝癌等多种恶性肿瘤中呈现高表达,本研究利用紫外线(ultraviolet,UV)诱导DNA损伤,观察Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶2(Rho associated coiled coilforming protein kinase 2,Rock2)基因对肝癌细胞生存的保护作用,并探讨其可能的作用机制.方法:将特异性抑制Rock2表达的干扰质粒shRock2转染到人肝癌细胞Huh-7和HepG2中,用荧光定量PCR及蛋白质印迹法(Western blot)检测Rock2 mRNA及蛋白的表达.通过UV照射造成肝癌细胞DNA损伤模型,用MTT比色法检测肝癌细胞增殖的变化,Western blot检测细胞分裂周期素25A(cell division cycle 25A,Cdc25A)蛋白表达的变化,并用能量共振转移法检测Cdk2/Cyclin E活性的改变.结果:shRock2转染到肝癌细胞后,其mRNA及蛋白的表达均明显降低;经过UV诱导肝癌细胞DNA损伤时,Rock2低表达组肝癌细胞较Rock2正常组肝癌细胞增殖受到抑制.Western blot检测发现,UV诱导DNA损伤时抑制Rock2表达可导致肝癌细胞中Cdc25A表达进一步下降,并且Cdk2/CyclinE活性也随Cdc25A的降低而降低.结论:UV诱导肝癌细胞DNA损伤时,Rock2通过调节Cdc25A对肝癌细胞的生存起保护作用,可能为肝癌基因表达调控研究提供新的靶基因.
揹景與目的:Rock2基因在肝癌等多種噁性腫瘤中呈現高錶達,本研究利用紫外線(ultraviolet,UV)誘導DNA損傷,觀察Rho相關捲麯螺鏇形成蛋白激酶2(Rho associated coiled coilforming protein kinase 2,Rock2)基因對肝癌細胞生存的保護作用,併探討其可能的作用機製.方法:將特異性抑製Rock2錶達的榦擾質粒shRock2轉染到人肝癌細胞Huh-7和HepG2中,用熒光定量PCR及蛋白質印跡法(Western blot)檢測Rock2 mRNA及蛋白的錶達.通過UV照射造成肝癌細胞DNA損傷模型,用MTT比色法檢測肝癌細胞增殖的變化,Western blot檢測細胞分裂週期素25A(cell division cycle 25A,Cdc25A)蛋白錶達的變化,併用能量共振轉移法檢測Cdk2/Cyclin E活性的改變.結果:shRock2轉染到肝癌細胞後,其mRNA及蛋白的錶達均明顯降低;經過UV誘導肝癌細胞DNA損傷時,Rock2低錶達組肝癌細胞較Rock2正常組肝癌細胞增殖受到抑製.Western blot檢測髮現,UV誘導DNA損傷時抑製Rock2錶達可導緻肝癌細胞中Cdc25A錶達進一步下降,併且Cdk2/CyclinE活性也隨Cdc25A的降低而降低.結論:UV誘導肝癌細胞DNA損傷時,Rock2通過調節Cdc25A對肝癌細胞的生存起保護作用,可能為肝癌基因錶達調控研究提供新的靶基因.
배경여목적:Rock2기인재간암등다충악성종류중정현고표체,본연구이용자외선(ultraviolet,UV)유도DNA손상,관찰Rho상관권곡라선형성단백격매2(Rho associated coiled coilforming protein kinase 2,Rock2)기인대간암세포생존적보호작용,병탐토기가능적작용궤제.방법:장특이성억제Rock2표체적간우질립shRock2전염도인간암세포Huh-7화HepG2중,용형광정량PCR급단백질인적법(Western blot)검측Rock2 mRNA급단백적표체.통과UV조사조성간암세포DNA손상모형,용MTT비색법검측간암세포증식적변화,Western blot검측세포분렬주기소25A(cell division cycle 25A,Cdc25A)단백표체적변화,병용능량공진전이법검측Cdk2/Cyclin E활성적개변.결과:shRock2전염도간암세포후,기mRNA급단백적표체균명현강저;경과UV유도간암세포DNA손상시,Rock2저표체조간암세포교Rock2정상조간암세포증식수도억제.Western blot검측발현,UV유도DNA손상시억제Rock2표체가도치간암세포중Cdc25A표체진일보하강,병차Cdk2/CyclinE활성야수Cdc25A적강저이강저.결론:UV유도간암세포DNA손상시,Rock2통과조절Cdc25A대간암세포적생존기보호작용,가능위간암기인표체조공연구제공신적파기인.
