中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2012年
12期
164-168
,共5页
沈培峰%付莉莉%孙雪飘%张家明
瀋培峰%付莉莉%孫雪飄%張傢明
침배봉%부리리%손설표%장가명
木薯%亚麻仁苷酶%生氰葡萄糖苷%重组蛋白%SDS-PAGE
木藷%亞痳仁苷酶%生氰葡萄糖苷%重組蛋白%SDS-PAGE
목서%아마인감매%생청포도당감%중조단백%SDS-PAGE
亚麻仁苷酶(Linamarase)是存在于木薯、巴豆等作物中的降解生氰葡萄糖苷Linamarin(亚麻仁苷)的酶,在结构上与芥子酶有很大的相似性,对它的研究有利于揭示生氰葡萄糖苷酶和芥子酶之间的关系以及芥子酶的起源问题.通过真核表达的方法,克隆了木薯Linamarase基因,构建酵母表达载体,转化毕赤酵母GS115,经诱导表达和亲和纯化,获得纯化的Linamarase重组蛋白.SDS-PAGE分析表明,重组蛋白分子量集中在71 kD左右.该酶最适反应温度在37℃左右,最适pH约为5.以pNPG为底物时,Km为1.70 mmol/L,最大反应速率Vmax为8.36 μmol/(min· mg).
亞痳仁苷酶(Linamarase)是存在于木藷、巴豆等作物中的降解生氰葡萄糖苷Linamarin(亞痳仁苷)的酶,在結構上與芥子酶有很大的相似性,對它的研究有利于揭示生氰葡萄糖苷酶和芥子酶之間的關繫以及芥子酶的起源問題.通過真覈錶達的方法,剋隆瞭木藷Linamarase基因,構建酵母錶達載體,轉化畢赤酵母GS115,經誘導錶達和親和純化,穫得純化的Linamarase重組蛋白.SDS-PAGE分析錶明,重組蛋白分子量集中在71 kD左右.該酶最適反應溫度在37℃左右,最適pH約為5.以pNPG為底物時,Km為1.70 mmol/L,最大反應速率Vmax為8.36 μmol/(min· mg).
아마인감매(Linamarase)시존재우목서、파두등작물중적강해생청포도당감Linamarin(아마인감)적매,재결구상여개자매유흔대적상사성,대타적연구유리우게시생청포도당감매화개자매지간적관계이급개자매적기원문제.통과진핵표체적방법,극륭료목서Linamarase기인,구건효모표체재체,전화필적효모GS115,경유도표체화친화순화,획득순화적Linamarase중조단백.SDS-PAGE분석표명,중조단백분자량집중재71 kD좌우.해매최괄반응온도재37℃좌우,최괄pH약위5.이pNPG위저물시,Km위1.70 mmol/L,최대반응속솔Vmax위8.36 μmol/(min· mg).
