中国男科学杂志
中國男科學雜誌
중국남과학잡지
CHINESE JOURNAL OF ANDROLOGY
2005年
3期
6-8,15
,共4页
丁之德%高惠宝%吴明章%张永莲
丁之德%高惠寶%吳明章%張永蓮
정지덕%고혜보%오명장%장영련
精子前向运动相关蛋白%附睾头部精子%凝胶切割%蛋白质纯化%计算机辅助的精子分析技术
精子前嚮運動相關蛋白%附睪頭部精子%凝膠切割%蛋白質純化%計算機輔助的精子分析技術
정자전향운동상관단백%부고두부정자%응효절할%단백질순화%계산궤보조적정자분석기술
目的进一步纯化人精浆中与精子前向运动相关的蛋白并进行活性鉴定.方法运用ConA包被珠的蛋白质亲和层析技术及超滤技术对热处理后的人精浆进行蛋白分离,随后对获得的层析洗脱液经浓缩后进行聚丙酰胺凝胶电泳及Commassie Blue R-250染色,根据染色部位将电泳凝胶切割成5部分并获得各部分的蛋白浸出液.结果含第2和第3部分蛋白浸出液的实验组与公牛附睾头部精子及茶碱共同孵育后,与仅用茶碱的对照组相比,前者的精子前向运动值显著高于后者(P＜0.01).聚丙酰胺凝胶电泳及银染色分析显示,第2和第3部分蛋白的分子量分别介于85.0～135.0kDa及44.1～85.0 kDa之间;而SDS-聚丙酰胺凝胶电泳分析却发现:第2部分蛋白解离成分子量分别为89,74,18,16 kDa的条带痕迹,第3部分蛋白则解离成46.8和57.5k Da的亚基.结论人精浆中与精子前向运动相关蛋白的纯化及活性分析可能对了解该蛋白的结构和功能具有重要的意义.
目的進一步純化人精漿中與精子前嚮運動相關的蛋白併進行活性鑒定.方法運用ConA包被珠的蛋白質親和層析技術及超濾技術對熱處理後的人精漿進行蛋白分離,隨後對穫得的層析洗脫液經濃縮後進行聚丙酰胺凝膠電泳及Commassie Blue R-250染色,根據染色部位將電泳凝膠切割成5部分併穫得各部分的蛋白浸齣液.結果含第2和第3部分蛋白浸齣液的實驗組與公牛附睪頭部精子及茶堿共同孵育後,與僅用茶堿的對照組相比,前者的精子前嚮運動值顯著高于後者(P＜0.01).聚丙酰胺凝膠電泳及銀染色分析顯示,第2和第3部分蛋白的分子量分彆介于85.0～135.0kDa及44.1～85.0 kDa之間;而SDS-聚丙酰胺凝膠電泳分析卻髮現:第2部分蛋白解離成分子量分彆為89,74,18,16 kDa的條帶痕跡,第3部分蛋白則解離成46.8和57.5k Da的亞基.結論人精漿中與精子前嚮運動相關蛋白的純化及活性分析可能對瞭解該蛋白的結構和功能具有重要的意義.
목적진일보순화인정장중여정자전향운동상관적단백병진행활성감정.방법운용ConA포피주적단백질친화층석기술급초려기술대열처리후적인정장진행단백분리,수후대획득적층석세탈액경농축후진행취병선알응효전영급Commassie Blue R-250염색,근거염색부위장전영응효절할성5부분병획득각부분적단백침출액.결과함제2화제3부분단백침출액적실험조여공우부고두부정자급다감공동부육후,여부용다감적대조조상비,전자적정자전향운동치현저고우후자(P＜0.01).취병선알응효전영급은염색분석현시,제2화제3부분단백적분자량분별개우85.0～135.0kDa급44.1～85.0 kDa지간;이SDS-취병선알응효전영분석각발현:제2부분단백해리성분자량분별위89,74,18,16 kDa적조대흔적,제3부분단백칙해리성46.8화57.5k Da적아기.결론인정장중여정자전향운동상관단백적순화급활성분석가능대료해해단백적결구화공능구유중요적의의.
