水生生物学报
水生生物學報
수생생물학보
ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA
2007年
2期
240-244
,共5页
集胞藻%PpetE%lacZ%铜离子
集胞藻%PpetE%lacZ%銅離子
집포조%PpetE%lacZ%동리자
在集胞藻PCC6803中,基因敲除是研究基因功能的最直接有效的方法,但是对于某些生存必需的基因则无法通过这种方法获得突变株.为研究集胞藻PCC6803中此类基因的功能 ,在其基因组中构建了一个petE基因启动子(PpetE)控制的铜离子诱导表达的平台.将集胞藻PpetE装配在lacZ报告基因的上游,通过同源双交换整合到这种蓝藻的基因组中.通过调节培养基中铜离子的浓度发现,lacZ的表达能够人为控制.特别是当铜离子浓度在6-400nmol/L范围时,LacZ活力随铜离子浓度增加呈S型增长关系.利用这个铜离子诱导表达平台,可以控制某些必需基因的表达:提供铜离子维持细胞生存;而撤去铜离子时则关闭基因的表达 ,可以观察其对生命活动的影响.
在集胞藻PCC6803中,基因敲除是研究基因功能的最直接有效的方法,但是對于某些生存必需的基因則無法通過這種方法穫得突變株.為研究集胞藻PCC6803中此類基因的功能 ,在其基因組中構建瞭一箇petE基因啟動子(PpetE)控製的銅離子誘導錶達的平檯.將集胞藻PpetE裝配在lacZ報告基因的上遊,通過同源雙交換整閤到這種藍藻的基因組中.通過調節培養基中銅離子的濃度髮現,lacZ的錶達能夠人為控製.特彆是噹銅離子濃度在6-400nmol/L範圍時,LacZ活力隨銅離子濃度增加呈S型增長關繫.利用這箇銅離子誘導錶達平檯,可以控製某些必需基因的錶達:提供銅離子維持細胞生存;而撤去銅離子時則關閉基因的錶達 ,可以觀察其對生命活動的影響.
재집포조PCC6803중,기인고제시연구기인공능적최직접유효적방법,단시대우모사생존필수적기인칙무법통과저충방법획득돌변주.위연구집포조PCC6803중차류기인적공능 ,재기기인조중구건료일개petE기인계동자(PpetE)공제적동리자유도표체적평태.장집포조PpetE장배재lacZ보고기인적상유,통과동원쌍교환정합도저충람조적기인조중.통과조절배양기중동리자적농도발현,lacZ적표체능구인위공제.특별시당동리자농도재6-400nmol/L범위시,LacZ활력수동리자농도증가정S형증장관계.이용저개동리자유도표체평태,가이공제모사필수기인적표체:제공동리자유지세포생존;이철거동리자시칙관폐기인적표체 ,가이관찰기대생명활동적영향.