生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2008年
2期
207-213
,共7页
施志仪%顾一峰%陈晓武%胡燕林
施誌儀%顧一峰%陳曉武%鬍燕林
시지의%고일봉%진효무%호연림
碱性磷酸酶%基因%5'调控区%克隆%功能
堿性燐痠酶%基因%5'調控區%剋隆%功能
감성린산매%기인%5'조공구%극륭%공능
通过基因组步移的方法扩增出一段924bp的牙鲆碱性磷酸酶基因5'调控区序列,在线软件分析表明5'调控区内可能含有GKLF、Oct、CREB、E2F、CEBP、GATA-1、Pitx-1、Pit-、RARE/TRE、AP4等转录因子结合位点.采用DNA重组的方法,将克隆得到的5'调控区片段插入启动子缺失的增强型绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-1中,构建重组表达载体pEGFP-JFALP.重组载体瞬时转染COS-7细胞,在倒置荧光显微镜下可以检测到绿色荧光信号,且荧光信号随着时间的延长而增强.结果 表明本实验克隆的牙鲆碱性磷酸酶基因5'调控区具有一定的启动子活性,为今后进一步研究碱性磷酸酶基因表达调控的分子机制奠定基础.
通過基因組步移的方法擴增齣一段924bp的牙鲆堿性燐痠酶基因5'調控區序列,在線軟件分析錶明5'調控區內可能含有GKLF、Oct、CREB、E2F、CEBP、GATA-1、Pitx-1、Pit-、RARE/TRE、AP4等轉錄因子結閤位點.採用DNA重組的方法,將剋隆得到的5'調控區片段插入啟動子缺失的增彊型綠色熒光蛋白錶達載體pEGFP-1中,構建重組錶達載體pEGFP-JFALP.重組載體瞬時轉染COS-7細胞,在倒置熒光顯微鏡下可以檢測到綠色熒光信號,且熒光信號隨著時間的延長而增彊.結果 錶明本實驗剋隆的牙鲆堿性燐痠酶基因5'調控區具有一定的啟動子活性,為今後進一步研究堿性燐痠酶基因錶達調控的分子機製奠定基礎.
통과기인조보이적방법확증출일단924bp적아평감성린산매기인5'조공구서렬,재선연건분석표명5'조공구내가능함유GKLF、Oct、CREB、E2F、CEBP、GATA-1、Pitx-1、Pit-、RARE/TRE、AP4등전록인자결합위점.채용DNA중조적방법,장극륭득도적5'조공구편단삽입계동자결실적증강형록색형광단백표체재체pEGFP-1중,구건중조표체재체pEGFP-JFALP.중조재체순시전염COS-7세포,재도치형광현미경하가이검측도록색형광신호,차형광신호수착시간적연장이증강.결과 표명본실험극륭적아평감성린산매기인5'조공구구유일정적계동자활성,위금후진일보연구감성린산매기인표체조공적분자궤제전정기출.
