CAJ | 학술논문

[目的]在原核系统中表达结核杆菌磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate car-boxykinase PEPCK),并研究该蛋白在诊断结核病人血清抗体中的应用价值.[方法]应用基因重组技术表达重组蛋白结核杆菌磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶,经亲和层析法纯化表达产物.用表达的重组蛋白免疫小鼠,研究其免疫学特性.间接酶联免疫吸附试验(Enzyme link immunosorbent assay,ELISA)检测结核病人血清中特异性IgG抗体,并与结核杆菌抗体胶体金法诊断试剂盒检测结果对比.[结果]试验表明转化入大肠杆菌中的重组质粒能够表达并纯化出相对分子量为72 kDa的重组蛋白;Western blot证实重组蛋白能够与小鼠抗BCG血清发生特异性反应;重组蛋白免疫小鼠后,小鼠血清中的抗体滴度可达1∶1280以上;重组蛋白用作ELISA包被抗原检测病人血清阳性率为17.3%(30/173),其中排菌病人的阳性率为32.5%(13/42),不排菌病人的阳性率为12.9%.该方法结果与结核杆菌抗体胶体金法诊断试剂盒的检测结果相比,敏感性为51.0%,特异性为96.7%.[结论]结核杆菌PEPCK具有较好的免疫原性和抗原性,有可能作为结核病血清学诊断的一组抗原之一.
[목적]재원핵계통중표체결핵간균린산희순형병동산최격매(phosphoenolpyruvate car-boxykinase PEPCK),병연구해단백재진단결핵병인혈청항체중적응용개치.[방법]응용기인중조기술표체중조단백결핵간균린산희순형병동산최격매,경친화층석법순화표체산물.용표체적중조단백면역소서,연구기면역학특성.간접매련면역흡부시험(Enzyme link immunosorbent assay,ELISA)검측결핵병인혈청중특이성IgG항체,병여결핵간균항체효체금법진단시제합검측결과대비.[결과]시험표명전화입대장간균중적중조질립능구표체병순화출상대분자량위72 kDa적중조단백;Western blot증실중조단백능구여소서항BCG혈청발생특이성반응;중조단백면역소서후,소서혈청중적항체적도가체1∶1280이상;중조단백용작ELISA포피항원검측병인혈청양성솔위17.3%(30/173),기중배균병인적양성솔위32.5%(13/42),불배균병인적양성솔위12.9%.해방법결과여결핵간균항체효체금법진단시제합적검측결과상비,민감성위51.0%,특이성위96.7%.[결론]결핵간균PEPCK구유교호적면역원성화항원성,유가능작위결핵병혈청학진단적일조항원지일.