口腔医学研究
口腔醫學研究
구강의학연구
JOURNAL OF ORAL SCIENCE RESEARCH
2009年
1期
19-22
,共4页
刘超%苗雷英%孙新华%孙宏晨%乔春燕
劉超%苗雷英%孫新華%孫宏晨%喬春燕
류초%묘뢰영%손신화%손굉신%교춘연
骨髓间充质干细胞%增强型绿色荧光蛋白%5-溴脱氧尿嘧啶核苷
骨髓間充質榦細胞%增彊型綠色熒光蛋白%5-溴脫氧尿嘧啶覈苷
골수간충질간세포%증강형록색형광단백%5-추탈양뇨밀정핵감
目的:研究5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromo-21-deoxyuridine,BrdU)和腺病毒介导的增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)标记骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的最佳标记时间与剂量,并进行比较.方法:密度梯度离心分离大鼠骨髓MSCs并体外扩增.AdCMV-EGFP分为100、200、400及800 particles/cell四组进行转染;BrdU以终浓度5、10、15 μmol/L进行标记.分别于实验第1、3、5、7 d检测两种方法对MSCs的标记率.通过MTT检测两种标记方法对细胞增殖活性的影响.结果:AdCMV-EGFP以100 particles/cell转染未引起MSCs凋亡,转染3d时效率最高(44.4±3.5%);BrdU以10 μmol/L、标记3 d的标记率为(75.1±3.1)%.两种方法均不影响细胞增殖.结论:AdCMV-EGFP和BrdU均可高效标记MSCs,根据研究需要不同均可作为高效的MSCs标记方法.
目的:研究5-溴脫氧尿嘧啶覈苷(5-Bromo-21-deoxyuridine,BrdU)和腺病毒介導的增彊型綠色熒光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)標記骨髓間充質榦細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的最佳標記時間與劑量,併進行比較.方法:密度梯度離心分離大鼠骨髓MSCs併體外擴增.AdCMV-EGFP分為100、200、400及800 particles/cell四組進行轉染;BrdU以終濃度5、10、15 μmol/L進行標記.分彆于實驗第1、3、5、7 d檢測兩種方法對MSCs的標記率.通過MTT檢測兩種標記方法對細胞增殖活性的影響.結果:AdCMV-EGFP以100 particles/cell轉染未引起MSCs凋亡,轉染3d時效率最高(44.4±3.5%);BrdU以10 μmol/L、標記3 d的標記率為(75.1±3.1)%.兩種方法均不影響細胞增殖.結論:AdCMV-EGFP和BrdU均可高效標記MSCs,根據研究需要不同均可作為高效的MSCs標記方法.
목적:연구5-추탈양뇨밀정핵감(5-Bromo-21-deoxyuridine,BrdU)화선병독개도적증강형록색형광단백(enhanced green fluorescent protein,EGFP)표기골수간충질간세포(mesenchymal stem cells,MSCs)적최가표기시간여제량,병진행비교.방법:밀도제도리심분리대서골수MSCs병체외확증.AdCMV-EGFP분위100、200、400급800 particles/cell사조진행전염;BrdU이종농도5、10、15 μmol/L진행표기.분별우실험제1、3、5、7 d검측량충방법대MSCs적표기솔.통과MTT검측량충표기방법대세포증식활성적영향.결과:AdCMV-EGFP이100 particles/cell전염미인기MSCs조망,전염3d시효솔최고(44.4±3.5%);BrdU이10 μmol/L、표기3 d적표기솔위(75.1±3.1)%.량충방법균불영향세포증식.결론:AdCMV-EGFP화BrdU균가고효표기MSCs,근거연구수요불동균가작위고효적MSCs표기방법.
