现代农业科技
現代農業科技
현대농업과기
XIANDAIHUA NONGYE
2009年
15期
308-310
,共3页
韩静芳%陈瑞爱%邵定勇%唐满华%梁桂益
韓靜芳%陳瑞愛%邵定勇%唐滿華%樑桂益
한정방%진서애%소정용%당만화%량계익
伪狂犬病毒%TK基因%通用转移载体
偽狂犬病毒%TK基因%通用轉移載體
위광견병독%TK기인%통용전이재체
以伪狂犬病毒为戢体表达其他痛原体抗原蛋白是伪狂犬痛疫苗研究的一个重要方向.根据已发表的伪狂犬病毒(PRV)Ra株TK基因序列设计2对引物,用PCR方法得到同源左右臂,克隆入PUC19载体中.利用平末端连接的方法将绿色荧光蛋白(EGFP)的基因表达盒插入到缺失位点,并在下游引入1个多克隆位点,构建缺失通用转移载体PUC19TK-EGFP.用脂质体转染试剂盒将PUC19TK-EGFP和PRv-Ra株的基因组共转染BHK细胞,以EGFP为标记基因,用噬斑法得到纯化的重组病毒,命名为TK/EGFP,为研制以伪狂犬病毒为载体的二价或多价基因工程疫苗奠定了物质基础.
以偽狂犬病毒為戢體錶達其他痛原體抗原蛋白是偽狂犬痛疫苗研究的一箇重要方嚮.根據已髮錶的偽狂犬病毒(PRV)Ra株TK基因序列設計2對引物,用PCR方法得到同源左右臂,剋隆入PUC19載體中.利用平末耑連接的方法將綠色熒光蛋白(EGFP)的基因錶達盒插入到缺失位點,併在下遊引入1箇多剋隆位點,構建缺失通用轉移載體PUC19TK-EGFP.用脂質體轉染試劑盒將PUC19TK-EGFP和PRv-Ra株的基因組共轉染BHK細胞,以EGFP為標記基因,用噬斑法得到純化的重組病毒,命名為TK/EGFP,為研製以偽狂犬病毒為載體的二價或多價基因工程疫苗奠定瞭物質基礎.
이위광견병독위집체표체기타통원체항원단백시위광견통역묘연구적일개중요방향.근거이발표적위광견병독(PRV)Ra주TK기인서렬설계2대인물,용PCR방법득도동원좌우비,극륭입PUC19재체중.이용평말단련접적방법장록색형광단백(EGFP)적기인표체합삽입도결실위점,병재하유인입1개다극륭위점,구건결실통용전이재체PUC19TK-EGFP.용지질체전염시제합장PUC19TK-EGFP화PRv-Ra주적기인조공전염BHK세포,이EGFP위표기기인,용서반법득도순화적중조병독,명명위TK/EGFP,위연제이위광견병독위재체적이개혹다개기인공정역묘전정료물질기출.
