CAJ | 학술논문

[目的]探讨降钙素基因相关肽(CGRP)预培养对冻存肝细胞的保护作用与机制.[方法]外科切除肝组织分成5组:①对照组(DMEM预培养0 h);②标准预培养组(DMEM预培养8 h);③CGRP三个浓度预培养组(10-6 mol/L,10-7 mol/L,10-8 mol/L;8 h).采用胶原酶灌注法分离肝细胞,经预培养后冻存5周,复苏,台盼蓝检测新鲜分离肝细胞成活率,并体外培养肝细胞48 h,用MTT 法观察肝细胞活力,收集细胞培养上清检测谷白蛋白(Alb),乳酸脱氢酶(LDH)水平,检测肝细胞内活性氧(ROS)及丙二醛(MDA)含量.[结果]预培养组及各 CGRP(10-6,10-7,10-8)处理组细胞成活率(53±5,63±6,61±6,58±7)、Alb合成(4.8±0.6,6.5±0.7,5.8±0.7,4.9±0.6)及MTT活性(0.25±0.07,0.38±0.06,0.31±0.05,0.22±0.03)较对照组(46±7,3.9±0.6;0.11±0.01)显著增加(P＜0.05),且CGRP(10-6,10-7)处理组细胞成活率、Alb合成及MTT活性显著高于预培养组(P＜0.05);预培养组及各CGRP (10-6,10-7,10-8)处理组肝细胞复苏后48h内LDH释放(25±7,15±4,17±5,18±6),ROS释放(107±9.5,62±4.8,70±7.1,80±5.8)及MDA水平(0.87±0.1,0.70±0.06,0.76±0.07,0.80±0.07)较对照组(31±6,120±8.5,1.31±0.04)显著减少(P＜0.05),且与预培养对照组比较,CGRP (10-6,10-7,10-8) 各处理组LDH及ROS释放显著减少(P＜0.05),CGRP (10-6,10-7)处理组MDA释放显著减少(P＜0.05).[结论]CGRP预培养对冻存引起的肝细胞损伤具有保护作用,其机制与抗氧化应激损伤有关.
[목적]탐토강개소기인상관태(CGRP)예배양대동존간세포적보호작용여궤제.[방법]외과절제간조직분성5조:①대조조(DMEM예배양0 h);②표준예배양조(DMEM예배양8 h);③CGRP삼개농도예배양조(10-6 mol/L,10-7 mol/L,10-8 mol/L;8 h).채용효원매관주법분리간세포,경예배양후동존5주,복소,태반람검측신선분리간세포성활솔,병체외배양간세포48 h,용MTT 법관찰간세포활력,수집세포배양상청검측곡백단백(Alb),유산탈경매(LDH)수평,검측간세포내활성양(ROS)급병이철(MDA)함량.[결과]예배양조급각 CGRP(10-6,10-7,10-8)처리조세포성활솔(53±5,63±6,61±6,58±7)、Alb합성(4.8±0.6,6.5±0.7,5.8±0.7,4.9±0.6)급MTT활성(0.25±0.07,0.38±0.06,0.31±0.05,0.22±0.03)교대조조(46±7,3.9±0.6;0.11±0.01)현저증가(P＜0.05),차CGRP(10-6,10-7)처리조세포성활솔、Alb합성급MTT활성현저고우예배양조(P＜0.05);예배양조급각CGRP (10-6,10-7,10-8)처리조간세포복소후48h내LDH석방(25±7,15±4,17±5,18±6),ROS석방(107±9.5,62±4.8,70±7.1,80±5.8)급MDA수평(0.87±0.1,0.70±0.06,0.76±0.07,0.80±0.07)교대조조(31±6,120±8.5,1.31±0.04)현저감소(P＜0.05),차여예배양대조조비교,CGRP (10-6,10-7,10-8) 각처리조LDH급ROS석방현저감소(P＜0.05),CGRP (10-6,10-7)처리조MDA석방현저감소(P＜0.05).[결론]CGRP예배양대동존인기적간세포손상구유보호작용,기궤제여항양화응격손상유관.