CAJ | 학술논문

目的:制备环丙沙星单克隆抗体,并分析其免疫学特性,为建立环丙沙星残留的免疫学检测方法服务.方法:用人工抗原环丙沙星-小牛血清白蛋白偶联物免疫BALB/c小鼠,产生预期免疫应答后,将小鼠脾细胞与瘤细胞融合,经初筛、复筛和再克隆,筛选得到1C9、3F6、6H2、6A7、6G11和8F5 6株分泌环丙沙星单克隆抗体的杂交瘤细胞.对单克隆抗体的亚型、纯度、亲和力、灵敏度及特异性等免疫学特性进行鉴定和分析.结果:1C9、3F6和6A7的抗体亚型为IgG2a;6H2和8F5的抗体亚型为IgG1;6G11的抗体亚型为IgG3.SDS-PAGE电泳结果显示单抗蛋白重链分子量约为50 kD,轻链分子量约为25 kD.6株细胞产生的单抗均具有良好的特异性和灵敏度.其中,细胞株1C9细胞培养上清和腹水效价分别为1:6.4×102和1:5.6×105,亲和力常数可达2.85×109 L/mol,IC50值可达245.86 ng/ml,最低检测限为45.25 ng/ml,对氧氟沙星、双氟沙星、沙拉沙星、左氧氟沙星、孔雀石绿、氯霉素、呋喃西林等药物几乎不存在交叉反应,与恩诺沙星存在交叉反应,交叉反应率为84.6%.结论:本方法制备的环丙沙星单克隆抗体具有较好的亲和力和特异性,可用于环丙沙星残留免疫学检测.
목적:제비배병사성단극륭항체,병분석기면역학특성,위건립배병사성잔류적면역학검측방법복무.방법:용인공항원배병사성-소우혈청백단백우련물면역BALB/c소서,산생예기면역응답후,장소서비세포여류세포융합,경초사、복사화재극륭,사선득도1C9、3F6、6H2、6A7、6G11화8F5 6주분비배병사성단극륭항체적잡교류세포.대단극륭항체적아형、순도、친화력、령민도급특이성등면역학특성진행감정화분석.결과:1C9、3F6화6A7적항체아형위IgG2a;6H2화8F5적항체아형위IgG1;6G11적항체아형위IgG3.SDS-PAGE전영결과현시단항단백중련분자량약위50 kD,경련분자량약위25 kD.6주세포산생적단항균구유량호적특이성화령민도.기중,세포주1C9세포배양상청화복수효개분별위1:6.4×102화1:5.6×105,친화력상수가체2.85×109 L/mol,IC50치가체245.86 ng/ml,최저검측한위45.25 ng/ml,대양불사성、쌍불사성、사랍사성、좌양불사성、공작석록、록매소、부남서림등약물궤호불존재교차반응,여은낙사성존재교차반응,교차반응솔위84.6%.결론:본방법제비적배병사성단극륭항체구유교호적친화력화특이성,가용우배병사성잔류면역학검측.