江西农业大学学报
江西農業大學學報
강서농업대학학보
ACTA AGRICULTURAE UNIVERSITATIS JIANGXIENSIS
2010年
4期
791-796
,共6页
邱爱连%刘林林%蔡汉阳%朱万里%黄木坤%陈雄%何水林%张健
邱愛連%劉林林%蔡漢暘%硃萬裏%黃木坤%陳雄%何水林%張健
구애련%류림림%채한양%주만리%황목곤%진웅%하수림%장건
辣椒%入门文库%目的文库%Gateway%酵母双杂
辣椒%入門文庫%目的文庫%Gateway%酵母雙雜
랄초%입문문고%목적문고%Gateway%효모쌍잡
构建cDNA文库是利用酵母双杂交技术开展特定cDNA分离的重要基础工作.利用Gateway技术,在成功提取辣椒总RNA并分离mRNA的基础上,合成了3种读码框的双链cDNA,通过BP反应构建其相应的入门文库,再通过LR反应将cDNA迅速且定向地重组到酵母双杂分析用目的载体pDESTTM22上,构建成高质量目的文库.经检测入门文库和目的文库滴度均达到(4.0～5.0)×106 cfu/ mL,文库总容量为(2.4～3.0)×107 cfu,平均插入片段大小为1 250 bp,其质量完全满足于进一步利用酵母双杂体系分析目的基因互作蛋白cDNA.
構建cDNA文庫是利用酵母雙雜交技術開展特定cDNA分離的重要基礎工作.利用Gateway技術,在成功提取辣椒總RNA併分離mRNA的基礎上,閤成瞭3種讀碼框的雙鏈cDNA,通過BP反應構建其相應的入門文庫,再通過LR反應將cDNA迅速且定嚮地重組到酵母雙雜分析用目的載體pDESTTM22上,構建成高質量目的文庫.經檢測入門文庫和目的文庫滴度均達到(4.0～5.0)×106 cfu/ mL,文庫總容量為(2.4～3.0)×107 cfu,平均插入片段大小為1 250 bp,其質量完全滿足于進一步利用酵母雙雜體繫分析目的基因互作蛋白cDNA.
구건cDNA문고시이용효모쌍잡교기술개전특정cDNA분리적중요기출공작.이용Gateway기술,재성공제취랄초총RNA병분리mRNA적기출상,합성료3충독마광적쌍련cDNA,통과BP반응구건기상응적입문문고,재통과LR반응장cDNA신속차정향지중조도효모쌍잡분석용목적재체pDESTTM22상,구건성고질량목적문고.경검측입문문고화목적문고적도균체도(4.0～5.0)×106 cfu/ mL,문고총용량위(2.4～3.0)×107 cfu,평균삽입편단대소위1 250 bp,기질량완전만족우진일보이용효모쌍잡체계분석목적기인호작단백cDNA.
