CAJ | 학술논문

目的:观察Graves病(GD)小鼠模型脾脏调节性B细胞(regulatoryB cells,Bregs)及相关细胞因子表达量的变化,探讨Bregs在GD发生、发展中的免疫调节作用.方法:将6周龄BALB/c雌性小鼠随机分为对照组(肌注空载腺病毒)、GD组(肌注TSHR-A亚单位-腺病毒建立GD小鼠模型).每3周免疫1次,第3次免疫3周后处死.留取小鼠血清,化学发光法检测FT4水平,细胞培养生物学方法检测TSAb活性.取甲状腺,制备石蜡切片行HE染色.取脾脏,部分制成单个核细胞悬液,行三标记免疫荧光染色、流式细胞分析CD1dhiCD5+ CD19+ Bregs比例；部分脾脏提取总RNA,实时定量RT-PCR检测Bregs相关细胞因子白细胞介素10(IL-10) mRNA和转化生长因子- β(TGF- β)mRNA的表达水平.结果:发生GD的小鼠甲状腺滤泡细胞增生肥大,且血清FT4及TSAb水平升高.小鼠血清TSAb与FT4水平呈显著正相关(r=0.90,P＜0.01)；TSHR-A亚单位-腺病毒免疫组发生GD的小鼠脾脏CD19+B细胞较对照组明显升高(P＜0.05),B细胞中CD1dhiCD5+ CD19+ Bregs所占比例和脾组织IL-10 mRNA、TGF-β mRNA表达量较对照组明显降低(P＜0.05)；且血清TSAb活性与CD1dhi CD5+ CD19+Bregs占脾脏B细胞比例、脾组织IL-10 mRNA、TGF-β mRNA表达量均呈显著负相关(P＜0.05).结论:TSHR-A亚单位-腺病毒免疫建立的GD模型中Bregs表达存在缺陷,提示Bregs表达可能在GD的发生及发展中发挥免疫调节作用,且GD疾病严重程度可能与Bregs缺乏程度有关.
목적:관찰Graves병(GD)소서모형비장조절성B세포(regulatoryB cells,Bregs)급상관세포인자표체량적변화,탐토Bregs재GD발생、발전중적면역조절작용.방법:장6주령BALB/c자성소서수궤분위대조조(기주공재선병독)、GD조(기주TSHR-A아단위-선병독건립GD소서모형).매3주면역1차,제3차면역3주후처사.류취소서혈청,화학발광법검측FT4수평,세포배양생물학방법검측TSAb활성.취갑상선,제비석사절편행HE염색.취비장,부분제성단개핵세포현액,행삼표기면역형광염색、류식세포분석CD1dhiCD5+ CD19+ Bregs비례；부분비장제취총RNA,실시정량RT-PCR검측Bregs상관세포인자백세포개소10(IL-10) mRNA화전화생장인자- β(TGF- β)mRNA적표체수평.결과:발생GD적소서갑상선려포세포증생비대,차혈청FT4급TSAb수평승고.소서혈청TSAb여FT4수평정현저정상관(r=0.90,P＜0.01)；TSHR-A아단위-선병독면역조발생GD적소서비장CD19+B세포교대조조명현승고(P＜0.05),B세포중CD1dhiCD5+ CD19+ Bregs소점비례화비조직IL-10 mRNA、TGF-β mRNA표체량교대조조명현강저(P＜0.05)；차혈청TSAb활성여CD1dhi CD5+ CD19+Bregs점비장B세포비례、비조직IL-10 mRNA、TGF-β mRNA표체량균정현저부상관(P＜0.05).결론:TSHR-A아단위-선병독면역건립적GD모형중Bregs표체존재결함,제시Bregs표체가능재GD적발생급발전중발휘면역조절작용,차GD질병엄중정도가능여Bregs결핍정도유관.